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病理論壇在線咨詢綠色環保無醛固定液與傳統甲醛固定液的區別
綠色環保無醛固定液與傳統甲醛固定液的區別
李冬梅 孫麗萍 王德田 羅玉鳳
中國醫學科學院 北京協和醫院
摘自：2012年《診斷病理學雜志》
一、實驗目的
通過GS無醛固定液與甲醛固定液的對比試驗，驗證GS環保試劑對組織形態、抗原性、RNA/DNA的保存能力。
二、實驗材料
我院病理科病人活檢及手術標本，乳腺癌、結腸癌、肺癌、卵巢癌、淋巴瘤五種組織，共12例樣本。
三、實驗方法
每例標本（未經固定的新鮮標本），各取12塊大小基本相同的實質性腫瘤組織，分別裝入10%中福爾馬林和GS無醛固定液中固定，并分別固定后1天（指24小時）、3天、7天、15天、30天、60天進行脫水包埋（其中無醛固定液固定的用GS系列脫水劑脫水）。待全部標本制備完成后，統一切片并同時進行HE染色和免疫組化試驗。
乳腺癌：ER、PR、C-erb-B2、Her-2基因熒光原位分子雜交
結腸癌：CA199、P53
肺癌：EGFR、Ki67
卵巢癌：CA125
淋巴瘤：LCA、CD20、CD45RO
關于Her-2基因熒光原位分子雜交檢測說明：Her-2基因熒光原位分子雜交可以先做C-erb-B2染色，選擇2例中1例C-erb-B2++至+++陽性的標本做FISH即可，具體做法可以首先選擇固定1天及60天的兩個時間點的兩種固定方式同時做免疫組化實驗，如60天時間點FISH檢測陽性，則其他時間點可以不做。如60天時間點為FISH陰性，則應繼續做固定30天時間點，依次類推直至做到FISH陽性的時間點。
四、試驗結果
|
腫瘤類型 |
實驗編號 |
Her-2 |
ER |
PR |
|
乳腺癌 |
RA1 RB1 |
0 0 |
+++ ++ |
+++ +++ |
|
RA2 RB2 |
0 0 |
+++ ++ |
+++ +++ |
|
|
RA3 RB3 |
0 0 |
+++ ++ |
0 0 |
|
|
RA4 RB4 |
切片未見CA組織，不做參考 |
|||
|
RA5 RB5 |
+++ +++ |
0 0 |
0 0 |
|
|
|
實驗編號 |
Ca199 |
P53 |
|
|
結腸Ca |
JA1 JB1 |
+ + |
_ _ |
|
|
JA2 JB2 |
+ + |
+ + |
|
|
|
JA3 JB3 |
+ + |
+ + |
|
|
|
|
實驗編號 |
EGFR |
Ki67 |
|
|
肺Ca |
FA1 FB1 |
+ + |
80% 50% |
|
|
FA2 FB2 |
+ + |
40% 20% |
|
|
|
|
實驗編號 |
CA-125 |
|
|
|
卵巢Ca |
LA1 LB1 |
+ + |
|
|
|
|
實驗編號 |
LCA |
CD20 |
CD45RO |
|
淋巴瘤 |
909184A1 909184A2 |
+ + |
+ + |
+ + |
A組:傳統甲醛固定組織 B組:GS無醛固定組織
HE染色：GS無醛固定液HE染色核漿對比度鮮明，胞漿染色偏紅，其他與傳統甲醛固定無明顯區別。免疫組織化學染色：ER、PR染色，GS無醛固定液RB組細胞核著色整體略淡，染色對比度差，其它各項染色強度高于傳統試劑甲醛固定RA組。
五、討論
傳統甲醛固定液對組織滲透力強、固定均勻，組織收縮小，成本低。但它易揮發，具有較強烈的刺激性和高劇毒性。隨著人們環保意識的提高，我們病理工作者都渴望建立有環保型的實驗室，減少甲醛、二甲苯等有毒液體在我們日常工作中對身體的危害。尋求一種******無害的環保試劑來代替甲醛、二甲苯是國內外病理技術工作者的又一新的跨越性目標。我們希望看到新型環保試劑的產生，它能做到：⑴無色、無刺激性、低揮發、不含甲醛等任何醛類化合物，易生物降解。⑵能夠保持良好的組織形態學結構。⑶有較強固定、脫水、脫脂兼硬化作用。⑷能限度地保護組織中抗原和核酸不被破壞、降解等特點。早日為我們病理技術工作者實現綠色、環保實驗室的夢想！
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