通過GS無醛固定液與甲醛固定液的對(duì)比試驗(yàn)，驗(yàn)證GS環(huán)保試劑對(duì)組織形態(tài)、抗原性、RNA/DNA的保存能力。

二、實(shí)驗(yàn)材料

我院病理科病人活檢及手術(shù)標(biāo)本，乳腺癌、結(jié)腸癌、肺癌、卵巢癌、淋巴瘤五種組織，共12例樣本。

三、實(shí)驗(yàn)方法

每例標(biāo)本（未經(jīng)固定的新鮮標(biāo)本），各取12塊大小基本相同的實(shí)質(zhì)性腫瘤組織，分別裝入10%中******爾馬林和GS無醛固定液中固定，并分別固定后1天（指24小時(shí)）、3天、7天、15天、30天、60天進(jìn)行脫水包埋（其中無醛固定液固定的用GS系列脫水劑脫水）。待全部標(biāo)本制備完成后，統(tǒng)一切片并同時(shí)進(jìn)行HE染色和免疫組化試驗(yàn)。

乳腺癌：ER、PR、C-erb-B2、Her-2基因熒光原位分子雜交

結(jié)腸癌：CA199、P53

肺癌：EGFR、Ki67

卵巢癌：CA125

淋巴瘤：LCA、CD20、CD45RO

關(guān)于Her-2基因熒光原位分子雜交檢測(cè)說明：Her-2基因熒光原位分子雜交可以先做C-erb-B2染色，選擇2例中1例C-erb-B2++至+++陽(yáng)性的標(biāo)本做FISH即可，具體做法可以首先選擇固定1天及60天的兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)的兩種固定方式同時(shí)做免疫組化實(shí)驗(yàn)，如60天時(shí)間點(diǎn)FISH檢測(cè)陽(yáng)性，則其他時(shí)間點(diǎn)可以不做。如60天時(shí)間點(diǎn)為FISH陰性，則應(yīng)繼續(xù)做固定30天時(shí)間點(diǎn)，依次類推直至做到FISH陽(yáng)性的時(shí)間點(diǎn)。

四、試驗(yàn)結(jié)果

A組:傳統(tǒng)甲醛固定組織                          B組:GS無醛固定組織

HE染色：GS無醛固定液HE染色核漿對(duì)比度鮮明，胞漿染色偏紅，其他與傳統(tǒng)甲醛固定無明顯區(qū)別。免疫組織化學(xué)染色：ER、PR染色，GS無醛固定液RB組細(xì)胞核著色整體略淡，染色對(duì)比度差，其它各項(xiàng)染色強(qiáng)度高于傳統(tǒng)試劑甲醛固定RA組。

五、討論

傳統(tǒng)甲醛固定液對(duì)組織滲透力強(qiáng)、固定均勻，組織收縮小，成本低。但它易揮發(fā)，具有較強(qiáng)烈的刺激性和高劇毒性。隨著人們環(huán)保意識(shí)的提高，我們病理工作者都渴望建立有環(huán)保型的實(shí)驗(yàn)室，減少甲醛、二甲苯等有毒液體在我們?nèi)粘９ぷ髦袑?duì)身體的危害。尋求一種******無害的環(huán)保試劑來代替甲醛、二甲苯是國(guó)內(nèi)外病理技術(shù)工作者的又一新的跨越性目標(biāo)。我們希望看到新型環(huán)保試劑的產(chǎn)生，它能做到：⑴無色、無刺激性、低揮發(fā)、不含甲醛等任何醛類化合物，易生物降解。⑵能夠保持良好的組織形態(tài)學(xué)結(jié)構(gòu)。⑶有較強(qiáng)固定、脫水、脫脂兼硬化作用。⑷能*** 大限度地保護(hù)組織中抗原和核酸不被破壞、降解等特點(diǎn)。早日為我們病理技術(shù)工作者實(shí)現(xiàn)綠色、環(huán)保實(shí)驗(yàn)室的夢(mèng)想！

添加時(shí)間：2016-04-13 點(diǎn)擊量：1461