異丙醇替代二甲苯在快速脫水程序中的應用
異丙醇替代二甲苯在快速脫水程序中的應用
薛曉偉 李星奇 王德田 鐘定榮
中國醫學科學院北京協和醫院病理科
摘自:2014年02期《診斷病理學雜志》
病理標本送至病理科,經過常規脫水染色程序后,才能進行診斷,這個過程往往需要3 ~5天。隨著小標本的數量增加,該脫水程序已不適合臨床對病理報告發放時間的要求。本文探討使用異丙醇替代二甲苯作為組織透明劑,應用于小標本的快速脫水。
1.材料與方法
1.1 材料
選取北京協和醫院7月臨床送檢的結腸等20 余例手術大標本。全自動封閉式脫水機peloris II 2臺,染色試劑為GS環保型染色套液,其它試劑為國產分析純,石蠟 LEICA (58℃ ~60℃)。
1.2 方法
送檢的大組織病理標本,經病理醫師模擬結腸鏡在每份標本的相同部位鉗取2份,隨機分為1h組和常規 組。1 h脫水程序:4%甲酸1 min, 85%乙醇1 min和6 min (55℃),乙醇/異丙醇混合液(4:1) 1 min和6 min (55℃ ),異丙醇 1 min X2,異丙醇 12 min (55℃),石蠟 20 min 和 5 min (85℃),石蠟1 min (65℃)。常規脫水程序(略)。程序完成 后,分別進行石蠟包埋,3 ~4 μm切片,GS環保型試劑HE染 色,GC-)2封片膠封固。
2.結果
2.1 兩組蠟塊質量比較
經多次實驗驗證,經1 h脫水程 序的小組織透明效果較好,硬度適中,蠟塊容易切出3 ~4 μm切片,切片完整無裂痕。與傳統試劑長時間脫水程序無明顯差別。
2.2 染色效果比較
經1h脫水程序制作的切片,HE染色后切片組織完整,厚薄均勻,核漿分明,符合優良片的標準 (圖 1,2)。
圖1為1h程序 圖2為常規程序
3.討論
病理科使用的透明劑二甲苯,因其價格低廉、透明效果好,常規應用于脫水和染色程序中。但是,二甲苯對************系統具有慢性毒性作用。近年來,多種二甲苯的替代劑相繼出現,本實驗中采用異丙醇作為快速脫水程序中的透明劑使用,采用GS環保型染色套液進行染色,取得了較好的效果。由于異丙醇處理組織過程中的重要作用是軟化組織,且對組織收縮作用較大,為避免組織由無水乙醇入 異丙醇造成的組織驟縮,本次實驗特別設計了省去無水乙醇,采用兩步乙醇/異丙醇4: 1混合液的方法。結果證明,組織沒有出現明顯的驟縮。同時,在HE染色過程中使用GS 環保型試劑,取得良好的制片效果,說明GS環保型試劑可以應用于快速脫水處理的切片染色中。
總之,異丙醇作為透明劑應用于快速脫水程序中是可行的,GS環保型試劑適用于快速脫水的組織切片染色,染色質量優良。快速脫水程序不僅能夠病理標本的個性化處理,減少患者病理報告等待時間,更重要的是對病理從業人員的二
甲苯接觸危害大大降低了。但是,經過異丙醇透明的快速脫水后的標本,特殊染色和免疫組化的質量如何,是我們下一步實驗所要探討的重點。
參考文獻
[1] 王德田,董建強,梁志勇.實用現代病理學技術[M].北京: 北京協和醫科大學出版社,2012:61 -62.
[2] 龍建洲.異丙醇替代二甲苯在組織透明中的應用[J].檢驗 醫學與臨床,2010:2(7) :161 -162.
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