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病理論壇在線咨詢GS組織染色套液在全自動(dòng)組織切片染色機(jī)中的應(yīng)用
GS組織染色套液在全自動(dòng)組織切片染色機(jī)中的應(yīng)用
張文 劉爽 劉亮 劉琳
白求恩國(guó)際和平醫(yī)院病理科
摘自：2014年01期《診斷病理學(xué)雜志》
在傳統(tǒng)HE染色過程中，組織切片脫蠟、透明常使用二甲苯，雖然制片技術(shù)穩(wěn)定，但是二甲苯易揮發(fā)、具有高度的刺激性，可使人體神經(jīng)系統(tǒng)、造血系統(tǒng)造成不同程度的損傷，蘇木素染液中含有汞成份，這些不僅對(duì)技術(shù)員的自身毒害很大，而且嚴(yán)重污染工作環(huán)境和生活環(huán)境。哈爾濱格林標(biāo)本技術(shù)開發(fā)有限公司研制的環(huán)保型GS組織染色套裝試劑，具有 環(huán)保、******、無(wú)色、無(wú)異味、無(wú)刺激性，染液PH值適中及不含汞成分等優(yōu)點(diǎn)，我們將其應(yīng)用到我院病理常規(guī)工作中，收到了較好的制片效果。
1. 材料與方法
1.1 標(biāo)本
隨機(jī)取自白求恩國(guó)際和平醫(yī)院手術(shù)標(biāo)本，包括乳腺、胃、食管、甲狀腺、淋巴結(jié)、肺、腎、腦、子宮、卵巢等。
1.2 試劑
GS組織染色套液包含組織脫蠟液、蘇木精染液、分化液、藍(lán)化液、伊紅染液、組織除水透明液、組織透明液等，環(huán)保封片膠，由哈爾濱格林標(biāo)本技術(shù)開發(fā)有限公司研制并生產(chǎn)。
1.3 方法
選取不同手術(shù)標(biāo)本組織塊進(jìn)行切片，各2套，厚4 pm。①傳統(tǒng)HE染色經(jīng)二甲苯I、I各3 min ；二甲苯III 4 min；無(wú)水乙醇I、II脫苯1 min；95%乙醇1 min x2次；85% 和75%乙醇各30 s；流水洗2 min；蘇木精2 ~ 8 min；流水洗 1 min；0.5%鹽酸乙醇分化3 s ，流水洗；水洗返藍(lán)2 min； 1% 水溶伊紅染30 s ~2 min；流水洗；85%乙醇30 s；95%乙醇 10 s；無(wú)水乙醇I 1 min；無(wú)水乙醇II 2 min ；二甲苯I 1 min；二甲苯II、II透明各2 min，中性樹膠封片。共耗時(shí)40 min。 L4環(huán)保型GS染色套液染色脫蠟液I4min、^各4min； 95%乙醇30 s，流水洗；蘇木精染3 min，流水洗15 s；分化液 3 s，流水洗1. 5 min；藍(lán)化液7 s，流水洗30 s ；伊紅染40 s；流水洗10 s；除浮液3 s ；除水透明液1 min ；透明液2 min ；環(huán)保封片膠封片。共耗時(shí)18 min左右。
2. 結(jié)果
同一例標(biāo)本切片分別進(jìn)行GS染色套液染色和傳統(tǒng)HE染色試劑染色，染色后比較，經(jīng)GS染色套液染色良好，細(xì)胞核染色清晰，伊紅顏色鮮艷，著色均勻一致，核漿對(duì)比分明， 色彩鮮艷、結(jié)構(gòu)顯示清晰，沒有過染和著色不良現(xiàn)象（圖1，2)。染色時(shí)間大大縮短，提高了工作效率。
國(guó)內(nèi)目前見有TO、VAN -CLEAR、WAX-OUT、益利、長(zhǎng)島、宏茲、江源等多種二甲苯替代產(chǎn)品試用報(bào)道，其性能各有優(yōu)劣，但缺乏大標(biāo)本量的使用報(bào)告。
我們采用同一例組織分別切片，同批進(jìn)行環(huán)保GS染色套液于Leica全自動(dòng)染色機(jī)染色和傳統(tǒng)HE染色試劑染色，染色對(duì)比分析，結(jié)果相當(dāng)滿意。應(yīng)用環(huán)保GS染色套液染色的切片，核漿對(duì)比分明，色彩鮮艷、結(jié)構(gòu)顯示清晰，明顯優(yōu)于傳統(tǒng)方法制片的HE染色。切片在染色過程中脫蠟、透明效果好，時(shí)間短，大大縮短了染色時(shí)間。染色套液中蘇木精液中無(wú)汞，對(duì)人體無(wú)害，染色效果好，效率高。同時(shí)GS封片膠中無(wú)苯，做到了******、無(wú)害。
環(huán)保GS染色套液經(jīng)大批量應(yīng)用于Leica全自動(dòng)染色機(jī)后，我們體會(huì)到，為保證染色結(jié)果穩(wěn)定，需染色累計(jì)計(jì)數(shù)后更新染色套液。即計(jì)數(shù)染色2000張切片后，更新整套環(huán)保GS 染色套液，更新后要試染色一次。其間每500張切片更新脫 蠟液、無(wú)水乙醇以及透明液。由于HE染色中的蘇木素核染 色為退行性染色，故蘇木素染色時(shí)間以及分化、藍(lán)化時(shí)間至 關(guān)重要，應(yīng)隨著染色片數(shù)的增加微調(diào)染色、分化藍(lán)化時(shí)間，且調(diào)整后要試染色一次。
綜上所述，環(huán)保型GS染色套液完全可以替代傳統(tǒng)方法，滿足病理診斷技術(shù)要求，減少或替代二甲苯毒害試劑的應(yīng)用，降低室內(nèi)有毒有害氣體的污染和毒害，從而杜絕排放此類毒化物對(duì)生活環(huán)境的污染，真正意義上實(shí)現(xiàn)了健康、環(huán) 保、優(yōu)質(zhì)、******。環(huán)保型GS染色套液值得在常規(guī)病理染色過程中推廣應(yīng)用。
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