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病理論壇在線咨詢GS環(huán)保型病理試劑的應(yīng)用及中期實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)
課題組織：中華醫(yī)學(xué)會(huì)病理學(xué)分會(huì)病理技術(shù)學(xué)組
參與單位：
北京協(xié)和醫(yī)院
醫(yī)科院腫瘤醫(yī)院
北京軍區(qū)總醫(yī)院
解放軍總醫(yī)院
北京大學(xué)腫瘤醫(yī)院
第二軍醫(yī)大學(xué)長(zhǎng)海醫(yī)院
第二軍醫(yī)大學(xué)長(zhǎng)征醫(yī)院
浙江大學(xué)******附院
第四軍醫(yī)大學(xué)西京醫(yī)院
南方醫(yī)科大學(xué)病理學(xué)系
鄭州大學(xué)******醫(yī)院
北京大學(xué)人民醫(yī)院病理中心實(shí)驗(yàn)室
GS環(huán)保型病理試劑的應(yīng)用及中期實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)
摘自：《2011全國(guó)西安病理技術(shù)學(xué)術(shù)會(huì)議暨全年
第七屆病理技術(shù)學(xué)術(shù)會(huì)議論文集》
病理組織制片、染色、免疫組織化學(xué)染色、組織原位雜交及核酸提取過(guò)程中，甲醛和二甲苯作為病理常規(guī)試劑被大量應(yīng)用。這些試劑是公認(rèn)的化學(xué)有毒有害高污染化學(xué)試劑，具有強(qiáng)烈的刺激性和揮發(fā)性，不僅污染實(shí)驗(yàn)室工作環(huán)境，而且嚴(yán)重危害身體健康。甲醛和二甲苯等有毒有害化學(xué)試劑的回收及無(wú)害化處理需要花費(fèi)高昂的費(fèi)用，而不經(jīng)無(wú)害化處理直接將其排放會(huì)造成城市水系和空氣的污染。隨著人們對(duì)健康環(huán)保工作和生活環(huán)境的不斷關(guān)注，醫(yī)務(wù)人員非?？释⒁粋€(gè)環(huán)保型實(shí)驗(yàn)室，以減少化學(xué)藥品對(duì)人類的危害。因此，尋找一種對(duì)人體******無(wú)害且環(huán)保的甲醛和二甲苯理想替代品，已成為國(guó)內(nèi)外病理技術(shù)工作者的一種迫切愿望。
GS環(huán)保型病理系列試劑的短期實(shí)驗(yàn)表明在病理組織學(xué)形態(tài)、免疫組織化學(xué)、核酸提取和FISH方面完全能夠達(dá)到臨床病理診斷的全部要求。為了考察GS系列試劑的中期技術(shù)性能，從2011年3月起我們組織了GS系列試劑的中期實(shí)驗(yàn)。
實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)結(jié)論：形態(tài)學(xué)、免疫組織化學(xué)、核酸提取、熒光實(shí)時(shí)定量PCR和組織原位熒光分子雜交實(shí)驗(yàn)的結(jié)果表明，格林標(biāo)本GS系列產(chǎn)品完全可以滿足病理技術(shù)的要求，在病理實(shí)驗(yàn)室徹底替代毒害污染嚴(yán)重的甲醛、二甲苯和汞，實(shí)現(xiàn)病理實(shí)驗(yàn)室的無(wú)害化。 SHAPE \* MERGEFORMAT SHAPE \* MERGEFORMAT
《GS無(wú)醛固定液及無(wú)醛無(wú)苯組織脫水系列試劑與甲醛二甲苯傳統(tǒng)試劑短中期固定脫水效果比較評(píng)價(jià)》
一、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
1. 課題目的
通過(guò)GS試劑與傳統(tǒng)試劑的比較試驗(yàn)，驗(yàn)證GS試劑在60天時(shí)間段對(duì)組織形態(tài)、抗原性、RNA/DNA的保存能力。
2. 參與課題單位及實(shí)驗(yàn)標(biāo)本選擇
北京協(xié)和醫(yī)院、醫(yī)科院腫瘤醫(yī)院、北京軍區(qū)總醫(yī)院、解放軍總醫(yī)院、北京大學(xué)腫瘤醫(yī)院、第二軍醫(yī)大學(xué)長(zhǎng)海醫(yī)院、第二軍醫(yī)大學(xué)長(zhǎng)征醫(yī)院、浙江大學(xué)******附院、第四軍醫(yī)大學(xué)西京醫(yī)院、南方醫(yī)科大學(xué)病理學(xué)系醫(yī)院、鄭州大學(xué)******醫(yī)院。每家醫(yī)院選擇乳腺癌、結(jié)腸癌、肺癌、卵巢癌、淋巴瘤、五種組織各兩例，總計(jì)110例標(biāo)本。
3. 課題設(shè)計(jì)及比較評(píng)價(jià)內(nèi)容
10%中性甲醛：固定1天、 3天、 7天、15天、30天、60天 共取材6塊
無(wú)醛型固定液：固定1天、 3天、 7天、15天、30天、60天 共取材6塊
為統(tǒng)一實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)，要求取得一個(gè)足夠大的標(biāo)本后（要求未經(jīng)固定的新鮮標(biāo)本），分成12塊不小于3mm×3mm的實(shí)質(zhì)性腫瘤組織，分別裝入10%中性甲醛和無(wú)醛型固定液中固定，分別于固定后1天（指24小時(shí)）、 3天、 7天、15天、30天、60天取出一塊組織脫水包埋。待全部標(biāo)本制備完成后，統(tǒng)一切片并同時(shí)進(jìn)行組化染色實(shí)驗(yàn)。
實(shí)驗(yàn)內(nèi)容：
乳腺癌-ER PR C-erb-B2 her-2基因熒光原位分子雜交
結(jié)腸癌- CA-19-9 p53
肺癌 - EGFR ki67
卵巢癌- CA-125
淋巴瘤- LCA CD20 CD45RO
以上腫瘤的核酸提取和相關(guān)腫瘤基因的熒光實(shí)時(shí)定量熒光PCR。
關(guān)于her-2基因熒光原位分子雜交檢測(cè)的說(shuō)明：
her-2基因熒光原位分子雜交可以先做C-erb-B2染色，選擇2例中一例C-erb-B2++至+++陽(yáng)性的標(biāo)本做FISH即可。具體做法可以首先選擇固定1天及60天的兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)，如60天時(shí)間點(diǎn)FISH檢測(cè)陽(yáng)性，則其他時(shí)間點(diǎn)可以不做。如60天時(shí)間點(diǎn)為FISH陰性，則應(yīng)繼續(xù)做固定30天時(shí)間點(diǎn)，依次類推直至做到FISH陽(yáng)性的時(shí)間點(diǎn)。
關(guān)于組織脫水的說(shuō)明：
10%甲醛固定的實(shí)驗(yàn)組織，使用傳統(tǒng)脫水方法脫水透明；
無(wú)醛固定液固定的實(shí)驗(yàn)組織，使用GS系列脫水透明
擬于2011年4月各課題單位開始于6月底基本完成實(shí)驗(yàn)評(píng)估。請(qǐng)保留實(shí)驗(yàn)標(biāo)本蠟塊，染色切片以及實(shí)驗(yàn)記錄數(shù)據(jù)資料。在完成實(shí)驗(yàn)后統(tǒng)一提交北大人民醫(yī)院病理中心實(shí)驗(yàn)室，以便統(tǒng)計(jì)分析。
二、關(guān)于環(huán)保型無(wú)醛組織固定液
1. 歷史回顧
采用甲醛固定組織的方法已延續(xù)了一百多年，甲醛對(duì)組織滲透能力強(qiáng)，組織固定均勻，組織收縮小，盡管它具有高毒性，但由于其成本低，能較好地保存組織結(jié)構(gòu)，因此至今仍廣泛被人們接受。甲醛主要存在以下缺點(diǎn)：
（1）易揮發(fā)，具有較強(qiáng)烈的刺激性，嚴(yán)重刺激呼吸道黏膜和眼結(jié)膜，強(qiáng)烈的刺激可引起呼吸困難和眼睛流淚。攝入和吸入易導(dǎo)致中毒。嚴(yán)重造成空氣和環(huán)境污染，而防護(hù)又極為困難。國(guó)內(nèi)外醫(yī)學(xué)研究證實(shí)，人體皮膚直接接觸甲醛時(shí)，會(huì)引發(fā)過(guò)敏反應(yīng)、皮炎或濕疹。長(zhǎng)期接觸甲醛可能會(huì)引發(fā)慢性呼吸道疾病和腫瘤發(fā)生，如鼻咽癌、結(jié)腸癌、腦瘤、白血病，引起體內(nèi)白細(xì)胞數(shù)量下降，導(dǎo)致記憶力和智力下降。2004年6月15日WHO正式宣布甲醛為致癌物質(zhì)，同時(shí)提醒人們要重視甲醛的致癌性，并采取預(yù)防措施。
（2）甲醛存放過(guò)久易聚合成三聚甲醛，而影響組織標(biāo)本固定效果。
（3）固定時(shí)間較長(zhǎng)的組織內(nèi)易形成甲醛色素，與含鐵血黃素相混淆，易導(dǎo)致組織酸化影響染色效果，使診斷受到嚴(yán)重影響。
（4）不能固定肝糖原和尿酸。
（5）廢液需特殊處理，應(yīng)由持證廢物運(yùn)輸或******企業(yè)來(lái)處置，盡可能蒸餾回收，不能直接排入下水道。廢液處理費(fèi)較高，每千克30-50元。在室溫下，用甲醛固定的組織很難保存高分子量DNA，造成DNA、RNA抽提困難，生物學(xué)分析成功率難以確定。抽提的DNA分子的大小又與固定的溫度直接相關(guān)。即使短暫的甲醛固定切片，其DNA的溶解度也會(huì)明顯降低（也會(huì)明顯降低DNA的可溶性）。在固定過(guò)程中，約有30%的核酸丟失。多項(xiàng)研究顯示，無(wú)交聯(lián)作用的醇類固定劑在保存DNA方面比醛類固定劑效果更好。但單純用乙醇類固定液，易導(dǎo)致核固縮、細(xì)胞空泡出現(xiàn)，組織皺縮，組織變硬變脆等缺陷。理想的固定液應(yīng)該是：毒性低，能有效地保存組織細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)、高度的保存組織細(xì)胞的免疫原性和DNA/RNA分子結(jié)構(gòu)，以便進(jìn)行免疫細(xì)胞/組織化學(xué)和分子生物學(xué)研究。
近年來(lái)，隨著對(duì)實(shí)驗(yàn)室環(huán)境安全更高的要求以及分子生物學(xué)飛速發(fā)展的需求，研發(fā)和生產(chǎn)理想的******低毒的甲醛替代固定劑已成大勢(shì)所趨刻不容緩。目前國(guó)內(nèi)外相繼研制并生產(chǎn)了環(huán)保型無(wú)醛固定劑，令人滿意的替代品具有極大的技術(shù)優(yōu)勢(shì)。如英國(guó)的FineFIX、美國(guó)的HISTOCHOICE 和國(guó)內(nèi)的GS新型生物組織標(biāo)本固定劑等。環(huán)保型無(wú)醛固定液是組織固定技術(shù)的革命性突破，使建立綠色病理實(shí)驗(yàn)室的理想成為現(xiàn)實(shí)。無(wú)醛固定劑的主要特點(diǎn)是：
（1）無(wú)色、無(wú)刺激性，低揮發(fā)性，不含甲醛等任何醛類化合物，綠色環(huán)保，易生物降解，使用后不會(huì)對(duì)環(huán)境產(chǎn)生危害。對(duì)組織滲透性強(qiáng)。
（2）能保持良好的組織形態(tài)學(xué)結(jié)構(gòu)，同時(shí)能保護(hù)細(xì)胞膜的完整性。
（3）有較強(qiáng)的固定、脫水、脫脂兼硬化作用，不易導(dǎo)致組織過(guò)度收縮，無(wú)細(xì)胞空泡與核固縮現(xiàn)象。
（4）能******限度地保護(hù)組織中的抗原和核酸不被破壞、降解或彌散。免疫組化檢測(cè)結(jié)果顯示：在相同染色條件下陽(yáng)性率和陽(yáng)性強(qiáng)度與傳統(tǒng)制片法效果基本一致。無(wú)醛固定液固定的組織，蛋白質(zhì)氨基酸分子之間不發(fā)生交聯(lián)，對(duì)組織內(nèi)抗原不構(gòu)成交聯(lián)型遮蓋，某些免疫組化檢測(cè)無(wú)需抗原修復(fù)處理，簡(jiǎn)化了免疫組化染色程序，******了修復(fù)可能產(chǎn)生的假陽(yáng)性，提高了抗原對(duì)抗體的敏感性。
（5）對(duì)DNA、RNA保存較佳，有利于對(duì)組織標(biāo)本的分子生物學(xué)研究。以乙醇成分為主的無(wú)醛固定劑，回收簡(jiǎn)便易行，不需甲醛中和劑進(jìn)行處理廢液，可依據(jù)乙醇廢液處理管理?xiàng)l例處置廢液。經(jīng)大量實(shí)際應(yīng)用，無(wú)醛固定液與傳統(tǒng)甲醛固定液處理的組織制片效果基本相同，完全可以取代甲醛對(duì)組織標(biāo)本進(jìn)行固定。
2. 國(guó)外環(huán)保型試劑的狀況
（1）FineFIX 是一種濃縮無(wú)醛固定劑，使用時(shí)以三倍的95%乙醇稀釋成工作液，被認(rèn)為是理想的甲醛替代品，可以獲得良好的組織細(xì)胞結(jié)構(gòu)、免疫原性和良好的核酸保存效果。在手術(shù)標(biāo)本的固定方面穿透速度較快，國(guó)外一些實(shí)驗(yàn)室對(duì)其固定效果進(jìn)行了HE染色形態(tài)學(xué)分析、免疫組織化學(xué)染色實(shí)驗(yàn)、RNA/DNA提取對(duì)比實(shí)驗(yàn)和PCR基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)結(jié)果滿意，被認(rèn)為在組織固定技方術(shù)方面具有里程碑式的進(jìn)步意義。目前國(guó)內(nèi)已有一些醫(yī)院使用FineFIX進(jìn)行標(biāo)本固定效果良好。
（2）TISSUE FIXATIVE-HISTOCHOICE 是美國(guó)Amresco公司生產(chǎn)的無(wú)醛環(huán)保型組織固定劑。目前在歐美和亞太一些國(guó)家的應(yīng)用試驗(yàn)證實(shí)了良好的效果。
TISSUE FIXATIVE-HISTOCHOICE 可用于常規(guī)組織學(xué)、免疫組織化學(xué)、分子雜交、細(xì)胞學(xué)等方面的組織固定。美國(guó)耶魯大學(xué)的一個(gè)試驗(yàn)小組對(duì)其性能進(jìn)行了較為******的分析。
Table 1 將HISTOCHOICE 和NBF（中******爾馬林）在涉及上皮、淋巴、神經(jīng)、血管和腫瘤標(biāo)志等 21種常用免疫組織化學(xué)染色的結(jié)果進(jìn)行了對(duì)比分析結(jié)果表明：57% 采用 HISTOCHOICE 固定的標(biāo)本染色結(jié)果具有較NBF更高的染色強(qiáng)度，28.6%的標(biāo)本染色結(jié)果兩種固定劑染色強(qiáng)度相同，14.3% 的標(biāo)本染色結(jié)果NBF具有更高的強(qiáng)度。
Table 2 對(duì)兩種固定液固定標(biāo)本染色的色值對(duì)比分析則表明：HISTOCHOICE 固定的標(biāo)本80%的染色色值優(yōu)于NBF。
3. GS無(wú)醛固定液：是國(guó)內(nèi)企業(yè)自行研制生產(chǎn)的環(huán)保型固定液，該無(wú)醛固定液目前已被數(shù)十家大型醫(yī)院使用。實(shí)驗(yàn)證明GS無(wú)醛固定液能夠良好的保存組織細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)，與甲醛相比具有更良好的鏡下形態(tài)結(jié)構(gòu)。
使用GS無(wú)醛組織標(biāo)本固定液固定GS系列脫水透明染色試劑制備的兔腎曲管切片 HE 染色
本次涉及全國(guó)十余家醫(yī)院和大學(xué)科研機(jī)構(gòu)的綜合實(shí)驗(yàn)表明，GS無(wú)醛固定液固定的外檢標(biāo)本，在病理形態(tài)學(xué)方面能夠保持良好的組織細(xì)胞形態(tài)、在大多數(shù)免疫組化染色中都能優(yōu)于或等于甲醛固定的同一組標(biāo)本。此外，GS無(wú)醛固定液固定的外檢標(biāo)本在核酸提取和實(shí)時(shí)定量熒光PCR對(duì)比實(shí)驗(yàn)中也獲得了滿意的結(jié)果。
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電泳圖中上半部為甲醛固定標(biāo)本下半部為GS無(wú)醛固定液固定的標(biāo)本1-9分別為1，結(jié)腸癌、2，卵巢粘液腺癌，3，移行細(xì)胞癌，4，肝癌、5，胰腺癌、6，鱗狀細(xì)胞癌、7乳腺癌、8，子宮內(nèi)膜癌、9，卵巢非粘液癌。
（圖1）用10%中性甲醛固定1天的乳腺癌，結(jié)腸癌，肺癌，卵巢癌，淋巴瘤的線性圖譜其基線期、指數(shù)增長(zhǎng)期、線性增長(zhǎng)期和平臺(tái)期理論擴(kuò)增成立。擴(kuò)增圖譜從左到右分別為乳腺癌，結(jié)腸癌，肺癌，卵巢癌，淋巴瘤。說(shuō)明10%中性甲醛固定1天能較好的保存了模板基因。
（圖2）GS組織固定脫水系列套裝試劑固定1天的乳腺癌，結(jié)腸癌，肺癌，卵巢癌，淋巴瘤的線性圖譜其基線期、指數(shù)增長(zhǎng)期、線性增長(zhǎng)期和平臺(tái)期理論擴(kuò)增成立。擴(kuò)增圖譜從左到右分別為乳腺癌，結(jié)腸癌，肺癌，卵巢癌，淋巴瘤。說(shuō)明GS組織固定脫水系列套裝試劑固定1天和10%中性甲醛固定1天的標(biāo)本大致相同，也能較好的保存模板基因。
（圖3）用10%中性甲醛固定60天的乳腺癌，結(jié)腸癌，肺癌，卵巢癌，淋巴瘤的線性圖譜其基線期，指數(shù)增長(zhǎng)期，線性增長(zhǎng)期和平臺(tái)期理論擴(kuò)增成立。擴(kuò)增圖譜從左到右分別為乳腺癌，結(jié)腸癌，肺癌，卵巢癌，淋巴瘤。說(shuō)明10%中性甲醛固定60天后仍能較好的保存了模板基因。
(圖4) GS組織固定脫水系列套裝試劑固定60天的乳腺癌，結(jié)腸癌，肺癌，卵巢癌，淋巴瘤的線性圖譜其基線期，指數(shù)增長(zhǎng)期，線性增長(zhǎng)期和平臺(tái)期理論擴(kuò)增成立。擴(kuò)增圖譜從左到右分別為乳腺癌，結(jié)腸癌，肺癌，卵巢癌，淋巴瘤。說(shuō)明GS組織固定脫水系列套裝試劑固定60天和10%中性甲醛固定60天的標(biāo)本大致相同，也能較好的保存模板基因。
實(shí)驗(yàn)證明，只要按照病理標(biāo)本固定取材規(guī)范的要求對(duì)病理標(biāo)本進(jìn)行規(guī)范化的固定和取材，完全采用GS無(wú)醛固定液和無(wú)笨脫水試劑制備的組織標(biāo)本可以良好的完成各項(xiàng)病理實(shí)驗(yàn)。此外本實(shí)驗(yàn)說(shuō)明，使用GS系列環(huán)保試劑處理的標(biāo)本具有良好的形態(tài)結(jié)構(gòu)和基因分子結(jié)構(gòu)保存性能。
三、環(huán)保型組織脫水透明染色系列試劑
1. 環(huán)保型組織透明劑的國(guó)內(nèi)外概況
傳統(tǒng)組織處理和染色過(guò)程中，目前被病理實(shí)驗(yàn)室大量使用的二甲苯是一種對(duì)人體具有較強(qiáng)毒害作用的有機(jī)化學(xué)試劑。它極易揮發(fā)，短期內(nèi)吸入高濃度二甲苯可出現(xiàn)上呼吸道明顯的刺激癥狀、眼結(jié)膜及咽部充血、頭暈、惡心、嘔吐、胸悶、四肢無(wú)力、意識(shí)模糊、步態(tài)蹣跚，重者可有躁動(dòng)，抽搐或昏迷，有的可能出現(xiàn)癔病樣發(fā)作。長(zhǎng)期使用會(huì)導(dǎo)致骨髓抑制，引起白細(xì)胞數(shù)量降低，有可能出現(xiàn)神經(jīng)衰弱綜合征，女性出現(xiàn)月經(jīng)異常，常出現(xiàn)皮膚干燥、皸裂、皮炎等。除對(duì)病理工作者的健康構(gòu)成威脅外，有的單位還將廢棄的二甲苯大量的傾倒進(jìn)下水道也造成了更大范圍的城市水系環(huán)境污染。普通的手套材料不能提供充分的保護(hù)。在組織處理過(guò)程中，若在二甲苯中浸泡時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，易產(chǎn)生組織收縮和硬化現(xiàn)象，影響制片質(zhì)量。
為了克服二甲苯存在的各種缺點(diǎn)，國(guó)內(nèi)外病理工作者都在試圖尋找一種較為理想的二甲苯代用品，既環(huán)保又能有效代替二甲苯的作用來(lái)滿足病理工作的需要。值得注意的是近幾年來(lái)國(guó)內(nèi)外市場(chǎng)上出現(xiàn)了一些環(huán)保型脫蠟劑、透明劑和封片劑，如美國(guó)Amresco公司生產(chǎn)的CLEARING AGENT、國(guó)產(chǎn)GS組織透明液、WaxOut、TO透明劑等。
除GS組織透明液外，絕大部分的此類試劑只偶見零星的使用經(jīng)驗(yàn)，而未見系統(tǒng)的大范圍、大樣本量的系統(tǒng)實(shí)驗(yàn)報(bào)道。這些試劑均為非苯類******型復(fù)合試劑，可以替代二甲苯對(duì)組織切片進(jìn)行脫蠟和染色脫水后的透明處理以及封片，徹底根除了二甲苯對(duì)人體的傷害及其對(duì)環(huán)境的污染。環(huán)保型脫蠟劑，使組織切片脫蠟徹底，速度快。環(huán)保型透明劑對(duì)組織滲透力強(qiáng)，處理組織軟硬適中，對(duì)組織處理柔和，組織標(biāo)本即使較長(zhǎng)時(shí)間浸泡在其中也不會(huì)出現(xiàn)明顯的收縮和硬化現(xiàn)象，不易使組織變硬變脆，特別是對(duì)子宮肌瘤、皮膚等較韌的含纖維較多的組織柔韌度較好，切片質(zhì)量好于傳統(tǒng)制片法。
總之，針對(duì)甲醛的高毒性、致癌性，國(guó)內(nèi)外學(xué)者進(jìn)行了多年研究，如在甲醛溶液中加入添加劑以減少甲醛的揮發(fā)，但效果仍不理想，即使加強(qiáng)通風(fēng)，并不能完全******其危害。使用環(huán)保試劑替代甲醛及苯類試劑后，從源頭上杜絕了有害試劑對(duì)室內(nèi)外環(huán)境的污染。環(huán)保型試劑的問(wèn)世，為建立“綠色實(shí)驗(yàn)室”奠定了良好基礎(chǔ)，未來(lái)的病理實(shí)驗(yàn)室將逐步成為環(huán)保型的實(shí)驗(yàn)室。經(jīng)大量實(shí)際應(yīng)用證實(shí)，環(huán)保型試劑，完全適用于病理診斷所需的常規(guī)ＨＥ染色、免疫組化染色、組織化學(xué)染色及熒光原位雜交檢測(cè)等，其各種染色效果與傳統(tǒng)方法制作的切片染色效果相同，可廣泛應(yīng)用于病理技術(shù)工作中。
美國(guó)Amresco公司生產(chǎn)的CLEARING AGENT、國(guó)產(chǎn)WaxOut、TO透明劑均為單一的組織脫蠟透明劑，經(jīng)試用證明可以替代二甲苯完成組織制片。WaxOut在北京的近十家醫(yī)院已有近10年的使用文獻(xiàn)資料。
格林標(biāo)本研制的GS系列組織脫水透明劑為系列試劑套裝，從2009年至今已有北京、上海、山東、河北、河南、廣西、湖南、陜西、江蘇、廣東等省市的數(shù)十家大中型醫(yī)院病理科和實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行試用并投入使用。目前，該系列環(huán)保型試劑包括：無(wú)醛標(biāo)本固定劑、無(wú)苯脫水套裝、無(wú)苯脫水機(jī)清洗劑、無(wú)苯無(wú)汞染色套裝和無(wú)苯封片膠、浸蠟及包埋切片石蠟。形成了完整的環(huán)保型病理專用試劑系列。
GS組織后固定脫水透明浸蠟和脫水機(jī)清洗液套裝試劑
格林標(biāo)本GS系列環(huán)保型病理組織標(biāo)本制備系列試劑，是一套具有開創(chuàng)性的組織病理學(xué)標(biāo)本制備試劑，實(shí)現(xiàn)了從標(biāo)本固定到完成各種染色直至切片封固全過(guò)程的無(wú)醛、無(wú)苯、無(wú)汞、環(huán)?；?。
使用GS組織脫水套裝試
劑的脫水程序及試劑更換方法
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儲(chǔ)液槽 |
試劑名稱 |
工作時(shí)間 |
合計(jì)時(shí)間 |
備 注 |
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1號(hào) |
固定液 |
2小時(shí) |
4小時(shí) |
注：在常溫、常壓下進(jìn)行組織處理。每次換液1.3.5.7.9液體倒掉；2.4.6.8.10液體前移。換液標(biāo)準(zhǔn)為，一般在處理標(biāo)本4500塊左右。 |
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2號(hào) |
固定液 |
2小時(shí) |
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3號(hào) |
80%乙醇 |
30分鐘 |
1小時(shí) |
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4號(hào) |
80%乙醇 |
30分鐘 |
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5號(hào) |
脫水液I |
40分鐘 |
1小時(shí)40分 |
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6號(hào) |
脫水液I |
1小時(shí) |
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7號(hào) |
脫水液II |
50分鐘 |
1小時(shí)50分 |
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8號(hào) |
脫水液II |
1小時(shí) |
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9號(hào) |
透明液 |
1小時(shí) |
2.5小時(shí) |
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10號(hào) |
透明液 |
1.5小時(shí) |
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蠟缸1 |
浸蠟液I |
2小時(shí) |
第1號(hào)浸蠟液每周須換一次，2.3.4號(hào)前移，3號(hào)或4號(hào)更新。 |
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蠟缸2 |
浸蠟液I |
1小時(shí) |
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蠟缸3 |
浸蠟液II |
30分鐘 |
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蠟缸4 |
浸蠟液II |
5分鐘 |
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11號(hào) |
工作槽清洗液I |
自動(dòng)標(biāo)準(zhǔn)清洗程序 |
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12號(hào) |
工作槽清洗液II |
自動(dòng)標(biāo)準(zhǔn)清洗程序 |
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13號(hào) |
無(wú)水乙醇 |
自動(dòng)標(biāo)準(zhǔn)清洗程序 |
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四、GS系列試劑聯(lián)合應(yīng)用的評(píng)價(jià)
在嚴(yán)格篩選基礎(chǔ)上，對(duì)具有詳細(xì)記錄的實(shí)驗(yàn)材料和數(shù)據(jù)納入對(duì)比分析評(píng)價(jià)
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標(biāo)本在甲醛傳統(tǒng)試劑中的實(shí)驗(yàn)過(guò)程 |
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標(biāo)本 |
標(biāo)本編號(hào) |
標(biāo)本病理號(hào) |
標(biāo)本取材時(shí)間 |
標(biāo)本固定時(shí)間 |
標(biāo)本前期固定時(shí)長(zhǎng) |
標(biāo)本處理 時(shí)長(zhǎng) |
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乳癌 |
R-A1(1) |
B0236094 |
3月2日 2:45pm |
3月2日 2:50pm |
24h |
14h6min |
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R-A1(3) |
B0236094 |
3月2日 2:45pm |
3月2日 2:50pm |
72h |
14h6min |
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R-A1(7) |
B0236094 |
3月2日 2:45pm |
3月2日 2:50pm |
168h |
14h6min |
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R-A1(15) |
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