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病理論壇在線咨詢環保試劑及超聲組織處理儀在乳腺癌粗針穿刺中的應用
環保試劑及超聲組織處理儀在乳腺癌粗針穿刺中的應用
趙潔 付海洋 王成勤
青島大學醫學院附屬醫院 病理學教研室
摘自：2013年01期《診斷病理學雜志》
常規乙醇一二甲苯制片法加上免疫組化染色往往需要1周時間，本文采用GS組織處理套液，利用超聲組織處理儀處理粗針穿刺乳腺標本，不僅大大縮短了診斷時間，且不影 響免疫組化染色效果，其方法如下。
1.材料與方法
1.1材料
青島大學醫學院附屬醫院2011-10—2012-4間送檢的乳腺粗針穿刺標本167例。GS組織樣本制備套液及 GS病理切片染色套液由哈爾濱格林標本技術開發有限公司提供；鈞鎰JYCL-2型超聲處理儀由山東鼎成醫療設備科技有限公司提供；Boond-nax型全自動免疫組化染色機由德國 徠卡公司提供。免疫組化—抗為北京中杉金橋生物有限公司提供，檢測系統為德國徠卡公司提供的Boond-nax專利的Compact polymer(緊湊型聚合物）檢測技術。
1.2方法
用超聲組織處理儀先將乳腺穿刺標本經4%中性緩沖甲醛前固定15 min，再用GS固定液45℃：固定10 min，GS環保型脫水試劑I、II及透明試劑50 ℃各處理15 min；62 ℃：浸蠟20 min；常規石蠟包埋、切片。GS組織樣本染色套液行HE、免疫組化染色均設外部陽性對照。
2. 結果
用GS組織樣本制備套液制作的蠟塊，切片軟硬適宜，厚薄均勻，尤其是帶脂肪的組織，切片完整。HE染色鏡下觀察組織結構清晰，紅藍對比分明；免疫組化染色無背景著色，結果與傳統方法無明顯差異（圖1 ~3)。
圖1 乳腺癌，HE染色
圖2乳腺癌，ER(+) EnVision法
圖3乳腺癌，c-；rBb~2 ( + ) EnVision法
3.討論
傳統制作標本的方法具有高毒性，易揮發等缺點，而環保型的GS組織樣本制備套液及GS病理切片染色套液，均為非苯類******型復合試劑，可替代二甲苯對組織的脫水及透明。
乳腺穿刺標本用GS環保型無醛固定液直接固定標本，HE染色時無明顯差異，但免疫組化染色時背景著色較重，這可能與GS環保型無醛固定液是以醇類為主體的復合固定液 有關；根據ASCO/CAP乳腺癌指南中規定乳腺標本必須經 4%中性緩沖甲醛固定的原則3 ，在使用環保試劑之前本文采用4%中性緩沖甲醛在常溫下應用超聲波對穿刺標本進行了前固定，取得滿意效果，在HER2檢測上尤為明顯，167例標本中HER2 (卅）為31例，其中7例經CISH、FISH檢測為HER2擴增，符合率均達100%。
環保型超聲處理儀有4個操作缸，缸內容量500ml， 可同時處理40余個標本，帶有定時啟動停止功能，溫度可調。處理乳腺穿刺標本時應注意:①由于超聲波的作用可產生一定的溫度，一定要確保實驗室通風，將設備放置在通風柜內；②脫水時因需加溫處理，試劑會蒸發，所以要及時觀察補充脫水缸中的試劑，總體要求500個標本徹底更換一次液體。
總之，應用GS環保型試劑可減少試劑對實驗室的污染， 而應用環保型超聲標本處理儀處理標本2天即可得到免疫組化結果。此方法在無冷凍切片機的基層單位也可應用于臨床快速病理診斷。
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