綠色環(huán)保無醛固定液與傳統(tǒng)甲醛固定液的區(qū)別
綠色環(huán)保無醛固定液與傳統(tǒng)甲醛固定液的區(qū)別
中國醫(yī)學科學院 北京協(xié)和醫(yī)院 李冬梅 孫麗萍** 王德田 羅玉鳳*
關(guān)鍵詞 綠色 環(huán)保固定 甲醛固定 區(qū)別
實驗目的:通過GS無醛固定液與甲醛固定液的對比試驗,驗證GS環(huán)保試劑對組織形態(tài)、抗原性、RNA/DNA的保存能力。
實驗材料:我院病理科病人活檢及手術(shù)標本,乳腺癌、結(jié)腸癌、肺癌、卵巢癌、淋巴瘤五種組織,共12例樣本。
實驗方法:每例標本(未經(jīng)固定的新鮮標本),各取12塊大小基本相同的實質(zhì)性腫瘤組織,分別裝入10%中福爾馬林和GS無醛固定液中固定,并分別固定后1天(指24小時)、3天、7天、15天、30天、60天進行脫水包埋(其中無醛固定液固定的用GS系列脫水劑脫水)。待全部標本制備完成后,統(tǒng)一切片并同時進行HE染色和免疫組化試驗。
乳腺癌:ER、PR、C-erb-B2、Her-2基因熒光原位分子雜交
結(jié)腸癌:CA199、P53
肺癌:EGFR、Ki67
卵巢癌:CA125
淋巴瘤:LCA、CD20、CD45RO
關(guān)于Her-2基因熒光原位分子雜交檢測說明:Her-2基因熒光原位分子雜交可以先做C-erb-B2染色,選擇2例中1例C-erb-B2++至+++陽性的標本做FISH即可,具體做法可以首先選擇固定1天及60天的兩個時間點的兩種固定方式同時做免疫組化實驗,如60天時間點FISH檢測陽性,則其他時間點可以不做。如60天時間點為FISH陰性,則應(yīng)繼續(xù)做固定30天時間點,依次類推直至做到FISH陽性的時間點。
腫瘤類型 |
實驗編號 |
Her-2 |
ER |
PR |
乳腺癌 |
RA1 RB1 |
0 0 |
+++ ++ |
+++ +++ |
RA2 RB2 |
0 0 |
+++ ++ |
+++ +++ |
|
RA3 RB3 |
0 0 |
+++ ++ |
0 0 |
|
RA4 RB4 |
切片未見CA組織,不做參考 |
A組:傳統(tǒng)甲醛固定組織 B組:GS無醛固定組織
固定時肉眼觀察:RA組液面渾濁,組織上浮。RB組液面清亮,組織變白變硬,有沉底現(xiàn)象。
HE染色:GS無醛固定液HE染色核漿對比度鮮明,胞漿染色偏紅,其他與傳統(tǒng)甲醛固定無明顯區(qū)別。免疫組織化學染色:ER、PR染色,GS無醛固定液RB組細胞核著色整體略淡,染色對比度差,其它各項染色強度高于傳統(tǒng)試劑甲醛固定RA組。
討論:傳統(tǒng)甲醛固定液對組織滲透力強、固定均勻,組織收縮小,成本低。但它易揮發(fā),具有較強烈的刺激性和高劇毒性。隨著人們環(huán)保意識的提高,我們病理工作者都渴望建立有環(huán)保型的實驗室,減少甲醛、二甲苯等有毒液體在我們?nèi)粘9ぷ髦袑ι眢w的危害。尋求一種******無害的環(huán)保試劑來代替甲醛、二甲苯是國內(nèi)外病理技術(shù)工作者的又一新的跨越性目標。我們希望看到新型環(huán)保試劑的產(chǎn)生,它能做到⑴無色、無刺激性、低揮發(fā)、不含甲醛等任何醛類化合物,易生物降解。⑵能夠保持良好的組織形態(tài)學結(jié)構(gòu)。⑶有較強固定、脫水、脫脂兼硬化作用。⑷能保護組織中抗原和核酸不被破壞、降解等特點。早日為我們病理技術(shù)工作者實現(xiàn)綠色、環(huán)保實驗室的夢想!
作者 郵編100730 江西省婦幼保健院
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