綠色環(huán)保無醛固定液與傳統(tǒng)甲醛固定液的區(qū)別

綠色環(huán)保無醛固定液與傳統(tǒng)甲醛固定液的區(qū)別

 

中國醫(yī)學科學院 北京協(xié)和醫(yī)院  李冬梅  孫麗萍**  王德田  羅玉鳳*

    關鍵詞  綠色  環(huán)保固定   甲醛固定  區(qū)別

 

實驗目的：通過GS無醛固定液與甲醛固定液的對比試驗，驗證GS環(huán)保試劑對組織形態(tài)、抗原性、RNA/DNA的保存能力。

實驗材料：我院病理科病人活檢及手術標本，乳腺癌、結(jié)腸癌、肺癌、卵巢癌、淋巴瘤五種組織，共12例樣本。

實驗方法：每例標本（未經(jīng)固定的新鮮標本），各取12塊大小基本相同的實質(zhì)性腫瘤組織，分別裝入10%中******爾馬林和GS無醛固定液中固定，并分別固定后1天（指24小時）、3天、7天、15天、30天、60天進行脫水包埋（其中無醛固定液固定的用GS系列脫水劑脫水）。待全部標本制備完成后，統(tǒng)一切片并同時進行HE染色和免疫組化試驗。

    乳腺癌：ER、PR、C-erb-B2、Her-2基因熒光原位分子雜交

    結(jié)腸癌：CA199、P53

    肺癌：EGFR、Ki67

    卵巢癌：CA125

    淋巴瘤：LCA、CD20、CD45RO

    關于Her-2基因熒光原位分子雜交檢測說明：Her-2基因熒光原位分子雜交可以先做C-erb-B2染色，選擇2例中1例C-erb-B2++至+++陽性的標本做FISH即可，具體做法可以首先選擇固定1天及60天的兩個時間點的兩種固定方式同時做免疫組化實驗，如60天時間點FISH檢測陽性，則其他時間點可以不做。如60天時間點為FISH陰性，則應繼續(xù)做固定30天時間點，依次類推直至做到FISH陽性的時間點。

腫瘤類型	實驗編號	Her-2	ER	PR
乳腺癌	RA1 RB1	0 0	+++ ++	+++ +++
	RA2 RB2	0 0	+++ ++	+++ +++
	RA3 RB3	0 0	+++ ++	0 0
	RA4 RB4	切片未見CA組織，不做參考

                A組:傳統(tǒng)甲醛固定組織                                               B組:GS無醛固定組織

固定時肉眼觀察:RA組液面渾濁，組織上浮。RB組液面清亮，組織變白變硬，有沉底現(xiàn)象。

    HE染色：GS無醛固定液HE染色核漿對比度鮮明，胞漿染色偏紅，其他與傳統(tǒng)甲醛固定無明顯區(qū)別。免疫組織化學染色：ER、PR染色，GS無醛固定液RB組細胞核著色整體略淡，染色對比度差，其它各項染色強度高于傳統(tǒng)試劑甲醛固定RA組。

討論：傳統(tǒng)甲醛固定液對組織滲透力強、固定均勻，組織收縮小，成本低。但它易揮發(fā)，具有較強烈的刺激性和高劇毒性。隨著人們環(huán)保意識的提高，我們病理工作者都渴望建立有環(huán)保型的實驗室，減少甲醛、二甲苯等有毒液體在我們?nèi)粘９ぷ髦袑ι眢w的危害。尋求一種******無害的環(huán)保試劑來代替甲醛、二甲苯是國內(nèi)外病理技術工作者的又一新的跨越性目標。我們希望看到新型環(huán)保試劑的產(chǎn)生，它能做到⑴無色、無刺激性、低揮發(fā)、不含甲醛等任何醛類化合物，易生物降解。⑵能夠保持良好的組織形態(tài)學結(jié)構。⑶有較強固定、脫水、脫脂兼硬化作用。⑷能******限度地保護組織中抗原和核酸不被破壞、降解等特點。早日為我們病理技術工作者實現(xiàn)綠色、環(huán)保實驗室的夢想！

    * 為通信作者  郵編100730       **江西省婦幼保健院

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添加時間：2016-04-12 點擊量：1203