GS環保試劑在病理制片中的應用體會
GS環保試劑在病理制片中的應用體會
郭效忠 苗志風 劉春榮 高遠 郭忠建 黨萬里
滄州市中心醫院
摘自:2012年第03期《診斷病理學雜志》
甲醛、二甲苯、氧化汞應用于病理常規制片技術至今已 100多年,雖方法成熟,但不環保。我院于2011年應用GS 組織樣本制備及切片染色套液對3000余例外科活檢標本進行批量實驗,制片結果與傳統方法基本一致,是一套能替代傳統試劑的環保型試劑。
1.材料與方法
1.1 材料收集滄州市中心醫院各種手術及活檢標本3000+例,包括乳腺癌、直腸癌、甲狀腺腫物、子宮肌瘤、膽囊、淋巴結、皮膚及腎穿刺組織,每份標本均常規取材2份,—份使用傳統試劑制片法,另一份采用GS試劑制片法。GS組織樣本制備套液及GS切片染色套液由哈爾濱格林標本技術開發有限公司研制并生產。
1.2 方法
1.2.1 傳統石蠟組織標本制片略。
1.2.2 GS環保試劑制片 GS固定液90min;固定液 90 min、80 min;脫水液 I 60 min x2;脫水液 n 60 min x2;透 明液40 min、50 min;浸蠟液I100 min、浸蠟液n為60 min、20 min。
1.2.3 傳統HE染色方法略。全程耗時40min。
1.2.4 GS染液染色程序脫蠟液I、II各4 min;95%乙醇 30 s;水洗;蘇木精染3 min;水洗15 s;分化液3's;水洗 1.5 min;藍化液7 s;水洗30 s;伊紅染40 s;水洗10 s;除浮液 3s ;除水透明液1 min、2 min;無苯膠封片。共耗時18 min。
1.2.5 特殊染色方法對傳統和GS試劑制備的腎組織樣本切片,按常規染色步驟分別進行PASM和Masson染色。
1.2.6 對傳統和GS試劑處理制備的乳腺癌切片按PV- 9000二步法分別進行ER染色,對直腸癌切片按PV~9000二步法分別進行TOPO Ia (拓撲異構酶Ia)染色。
2.結果
2.1 切片采用GS套液制備的組織蠟塊,組織塊切片感覺 軟硬適宜,連續性好,厚薄均勻,與傳統制備的組織蠟塊切片效果基本一致。脂肪、大網膜、子宮肌瘤、皮膚等組織切片效果優于傳統方法。腎穿刺組織較傳統方法易切出較薄切片。
2.2 染色①HE染色:采用GS染色套液色澤艷麗、核漿分明,與傳統試劑HE染色效果無明顯差異,子宮肌瘤、網膜 組織染色要優于傳統方法。采用GS組織樣本套液制備的石蠟切片,ER (圖1)和TOPOIIa染色與傳統方法效果相同,陽性結果定位準確,著色較強,背景清晰,表明抗原保存較好。②特殊組織染色:采用GS方法制片PASM (圖2)和 Masson染色,著色部位準確色澤艷麗分明,與傳統方法制片染色效果相同。
圖1乳腺癌ER ( + ) GS制片 圖2 腎穿刺PASM (+) GS制片
3.討論
GS固定液無醛、******、低揮發,對組織滲透強、均勻,固定效果好,取材與切片有較好效果,并能充分保護細胞內抗原,保證正常生物學研究。
GS脫水液脫水效果好,較均勻適宜,處理的組織軟硬適中,尤其對脂肪、較硬組織要優于傳統制片方法。
GS透明液無苯、******,對組織透明效果較好,滲透溫和,處理組織軟硬適中,浸蠟徹底,切片效果好;在切片染色過程中脫蠟、透明效果好,大大縮短了染色時間,提高染色效果。
GS切片染色套液中蘇木素精液中無汞、******,染色效果好,效率高。鏡下色澤艷麗,結構清晰,同時GS封片膠中無 苯、******。
通過我們批量試驗,每1000 ml GS組織樣本制備套液能處理組織約1500塊。
綜上所述,GS組織樣本制備及切片染色套液,可完全替代傳統的以甲醛、二甲苯為主體的石蠟制片技術流程,完全滿足病理診斷技術要求,真正意義上實現了健康、環保、優質、******。下載地址: