GS試劑在病理自動化染色中的臨床應用

GS試劑在病理自動化染色中的臨床應用

楊琪  唐雪芳

湖南省湘鄉市人民醫院

摘自：2015年《當代醫學》

常規病理技術常用的固定劑為4％甲醛，脫水、透明的主要試劑為乙醇和二甲苯。已有研究中證實，常規病理技術應用中相關的試劑多具有較強的刺激性和揮發性，不但病理技術應用存在一定局限，且還會對相關人員的身體健康造成不良影響。因此，尋找一種對人體******、無害且安全的替代品已成為病理技術工作者的一種迫切愿望。本研究分別通過GS試劑和傳統試劑制備組織切片，并將其分別應用在病理自動化染色的過程中，比較不同方法、不同試劑制備的組織切片的染色效果，現報道如下。

1. 資料與方法

 1.1 一般資料 

選取湘鄉市人民醫院自2013年5月～2015年2月期間臨床送檢的不同活體組織病理標本共計4014例，包括乳腺、結直腸、食管、胃、甲狀腺腫物、淋巴結、皮膚、膽囊、脂肪、子宮宮頸、肝臟、扁桃體及腎穿刺組織等不同部分的新鮮病理組織，每份標本都取材2個組織塊（組織塊的大小為1.5cm×1.0cm×0.2cm），并分別采用GS環保套液石蠟制片法和傳統的石蠟制片法對組織進行處理制片（固定、脫水、透明、浸蠟），然后將其進行病理自動化染色，將采用GS環保套液處理的標本作為觀察組，將傳統試劑處理的標本作為對照組，比較兩組組織標本的制片、染色效果。

 1.2  方法  

采用同一型號全自動脫水機、石蠟切片機、生物組織自動包埋機以及全自動染色機等。GS環保套液由哈爾濱格林公司研究開發生產的。

 1.2.1  對照組 

本組組織樣本所采用的是經傳統石蠟制片法制片并采用傳統HE染色法染色方法。制片方法為：采用4%的中性甲醛（或者95%的乙醇和甲醛溶液以9∶1的比例配成固定液）對組織進行固定，經乙醇脫水（經濃度為70%、80%、95%的乙醇和無水乙醇進行梯度脫水），二甲苯透明，浸臘后使用石蠟包埋。將其切成4～5μm厚的切片。染色方法為：切片70℃烤片10min；分別使用二甲苯Ⅰ和二甲苯Ⅱ脫蠟各5min，然后使用無水乙醇、95%乙醇、80%乙醇梯度脫水各2min，自來水沖洗3min；蘇木精染色8min，自來水沖洗3min；1%鹽酸分化液分化7s，自來水沖洗；藍化液1min，自來水沖洗1min；1%伊紅染色3min，自來水沖洗7s；70%乙醇、95%乙醇各10s；無水乙醇Ⅰ、無水乙醇Ⅱ各3min；二甲苯Ⅰ、二甲苯Ⅱ各3min；中性樹膠封固。

 1.2.2  觀察組 

本組組織樣本所采用的是經過GS環保染色試劑制片并采用全自動HE染色方法。制片方法為：采用GS無醛固定液對組織進行固定，分別采用脫水液、透明液、浸蠟液分別進行脫水、透明和包埋，采用石蠟切片機進行切片處理。對于標本體積較小的腎穿刺標本而言，需要采用手工單獨處理的方法進行制片，制片的步驟同上。染色方法為：切片70℃烤片10min；分別使用GS脫蠟液Ⅰ和GS脫蠟液Ⅱ脫蠟5min；然后使用無水乙醇、95%乙醇脫水各30s，自來水沖洗2min；蘇木精染色4min，自來水沖洗1min；1%鹽酸酒精分化5s，自來水沖洗3min；藍化液染色1min，自來水沖洗1min；1%伊紅染色2min，自來水沖洗10s；除浮染液10s；無水乙醇1min；除水透明1min；透明1min；無苯封片膠封固。

1.3  統計學處理 

用SPSS.17.0統計軟件進行數據處理，計量資料采用“x±s”表示，組間比較采用t檢驗；計數資料用例數（n）表示，計數資料組間率（%）的比較采用2檢驗；以P＜0.05為差異有統計學意義。

2. 結果

4014例患者的病理組織經GS環保套液制片與經傳統石蠟制片法制片后，比較其組織切片可見，觀察組經GS環保套液制片的組織切片效果更加良好，均未出現脫水不完全，組織變脆和變硬的情況；2種方法制片后經HE染色，經GS環保套液染色的時間更短（P＜0.05），且經HE染色后，染色更加均勻，組織細胞的結果清晰，細胞間的裂隙較少。見表1。

3. 討論

在常規的病理技術工作中，常需要對病理組織樣本進行制片染色來對其進行分析和研究，但是在脫水、固定等過程中常用的試劑，如甲醛、二甲苯等都具有十分強烈的揮發性和刺激性，不僅對實驗室工作人員的身體健康會產生較大的危害，還會對環境造成很大的污染。因而，尋找性能穩定的能夠代替甲醛、二甲苯等有害試劑的******、環保試劑對于病理技術工作人員和環境保護都具有十分重要的意義，GS環保試劑應運而生。

本研究采用了哈爾濱格林公司開發研制的GS環保試劑和傳統的甲醛、二甲苯試劑對不同部位的病理組織標本進行制片和染色，結果可見GS試劑不僅在制片過程中具有更強的滲透性，且能夠有效縮短染色過程中的脫水時間，保證組織的細胞能保持原有的結構，不會發生過度脫水而致收縮的現象；由于GS環保套液中的蘇木精染液著色迅速，分化后沖洗時間短，也提高了染液的穩定性。在切片的時候，不論對切片的厚度要求怎樣，都能發現切片中的組織染色均勻完整，且在顯微鏡下細胞核和細胞質的顏色分明，色澤十分亮麗鮮艷，有利于更加清晰直觀的觀察病理組織的細胞結構。

綜上所述，在病理技術工作中，采用GS環保試劑代替傳統的甲醛和二甲苯具有******、無污染、無異味釋放的優點，染色效果更加滿意，且安全性好，制片和染色時間短，值得在病理技術工作中進行推廣。

參考文獻

[1] 郭效忠，苗志風，劉春榮，等.GS環保試劑在病理制片中的應用體會[J].診斷病理學雜志，2012，7(3)：32.

[2] 寇雪梅，趙玉瑩.GS環保套液在病理技術工作中的應用[J].黑龍江醫學，2012，36(9)：676-677.

[3] 田玉旺，朱紅艷，苗金紅，等.GS環保試劑在病理制片技術中的應用[J].診斷病理學雜志，2011，18(4)：312-313.

[4] 宋一民，高冬玲，郝志偉.GS環保染色套液在病理常規染色中的應用[J].診斷病理學雜志，2014，21(4)：256.

[5] 易紅梅，李艷春，鐘仁華，等.GS環保型試劑在病理技術工作中的應用體會[J].臨床與實驗病理學雜志，2014，30(4)：463-464.

[6] 苗金紅，田玉旺，朱紅艷.GS環保試劑在特殊染色中的應用[J].診斷病理學雜志，2013，20(11)：736-737.

[7] 朱衛國，劉春玲，寇雪梅，等.格林組織標本制備及切片染色套液在病理實驗室中的應用[J].武警醫學，2012，23(7)：610-611.

[8] 孫廷誼，謝紅建，孔令非.GS試劑在病理自動化染色中的應用[J].診斷病理學雜志，2013，20(4)：254-255.

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