GS環保套液在病理技術工作中的應用

GS環保套液在病理技術工作中的應用

寇雪梅  趙玉瑩

武警北京總隊第二醫院病理科  黑龍江省口腔病防治院

摘自：2012年09期《黑龍江醫學》

在病理技術工作中，甲醛和二甲苯做為常規試劑被大量應用，但這些試劑是具有強烈刺激性的揮發性液體，不僅污染環境，還嚴重危害人體健康。 因此，迫切需要尋找一種******、無害，且安全可靠的甲醛和二甲苯替代品。我們將GS環保套液應用于病理技術工作中，獲得滿意結果?，F介紹如下：

1. 材料和方法

 1.1 標本

選取我院臨床送檢的各種活體組織病理標本，如：胃、腸、肝、脾、乳腺、子宮、淋巴結、脂肪等，常規取材，切成1. 5 cm X 1. 0 cm X 0. 2 cm大小的組織塊，包括穿刺活檢和腔鏡活檢的小標本，裝人包埋盒中，放人GS無醛固定液中固定12 h。

 1.2 主要儀器和試劑

脫水機Leica ASP 200型，切片機Leica 2245 型，免疫組化試劑（中杉公司），GS組織樣本制備及染色套液（哈爾濱格林公司）。

 1.3 方法

  1.3. 1 GS環保套液制片方法

標本放人Leica全自動脫水機處理，具體各個工作缸裝液體和運行時間如下：（1) GS無醛固定液1 h；(2) GS無醛固定液 3 h；(3) GS 脫水劑I，30 min；(4) GS 脫水劑 I， 1 h；(5) GS 脫水劑 Ⅱ，30 min；(6) GS 脫水劑 Ⅱ，1 h；(7)GS 透明劑 1 h；(8)GS 透明劑 2 h；(9)GS 石蠟 I，2h；(10)GS 石蠟 I，2h；(11)GS 石蠟 Ⅱ，1 h（注:脫水機內裝的GS套液為2套，更換試劑時，只需將前一個缸的試劑倒掉，把后一個缸前移即可）。

  1.3.2 GS環保套液HE染色步驟

染色時間為15 ~30 min，具體：（1)GS脫蠟液I，5 min，脫蠟液 Ⅱ，5 min；自來水洗，2 min；(2)蘇木素染色 3 ~5 min， 自來水洗，10 s；(3)常規分化、藍化、伊紅染色后， 自來水洗3 s；(4)除浮染液3 s，瀝干殘留試劑；（5) 除水透明液1 min，瀝干；（6)透明液3 min，無苯封片劑封片。

  1.3.3免疫組化染色

采用一步法進行，具體步驟同常規。

2. 結果

使用GS套液制備的組織蠟塊，在切片中感覺組織軟硬適中，尤其是處理皮膚、肌瘤等組織，沒有過硬現象，切片厚薄均勻，連續性好，常規HE染色速度快，組織結構清晰，細胞形態完整，核槳比清晰，與傳統組織切片染色結果相比無明顯差異（見圖 l ~5)。

                       圖4 HE4 > (乳腺，GS套液制作)

      圖5 HE4>(脂肪，GS套液制作)

采用GS套液制備的組織石蠟切片，經免疫組化染色顯示細胞內抗原性保存好，陽性結果定位準 確，背景清晰（見圖6、7)，與傳統組織染色效果無明顯差異。

 

3. 討論

 3.l  甲醛固定液的優缺點

組織處理過程中，組織固定直接影響病理切片的質量和免疫組化標記的結果。因此，選擇一種安全有效的組織固定液，對病理診斷至關重要。傳統的甲醛固定液由于其滲透能力強，固定均勻，組織收縮小，一直作為病理科常規固定液。但其缺點如下:①有刺激性氣味，易揮發，接觸皮膚可致過敏；②存放過久可產生三聚甲醛，影響固定效果； ③易形成甲醛色素，與含鐵血黃素相混淆；④不能固定肝糖元和尿酸；⑤長時間固定影響染色效果；⑥廢液需特殊處理，不能直接排人管道。而其******的危害是對人體的侵害。2004年，WHO宣布其為致癌物，提醒人們重視甲醛的致癌性，采取預防措施。

 3.2  制片過程

常規石蠟制片過程中，組織固定后需要脫水、透明、浸蠟處理，以及石蠟切片都必須經脫蠟處理后才能進行染色。二甲苯，一直作為透明、脫蠟的常規試劑，但二甲苯屬于中度毒性的化學試劑，會對長期在二甲苯環境下工作的人員的身體造成損害，導致頭暈、******、*********低下，是致癌物質之一。

 3.3  GS環保套液與傳統方法的區別

GS環保套液是無醛、無苯，******、無異味，與傳 統方法相比主要特點：①固定液組織滲透力強，pH中性，能縮短脫水時間；②能保持良好的組織形態學結構，保護組織中的抗原和核酸不被破壞；③脫水效果好，不會產生組織脫水過度或不夠的現象，大小組織可同時進行處理，尤其對脂肪、皮膚、子宮 肌瘤等組織處理優于傳統制片方法；④GS透明液對組織處理溫和，不易使組織變硬變脆；⑤GS脫蠟液可使組織脫蠟徹底，速度快；⑥染色步驟簡化，節省時間；⑦所有廢液回收方便，不需特殊處理。

3. 4使用GS套液與傳統方法制片在HE染色、免疫組化染色方面相比，GS套液更加環保均能達到滿意效果，符合臨床病理診斷要求，且從根本上根除了甲醛和二甲苯對人類和環境的危害，符合實驗室環保要求，值得在病理技術工作中廣泛應用。

 

參考文獻

[1] 蔣學之，張瑞穩，王耕蘭.甲醛接觸人員腫瘤死亡流行病學[J].中華勞動衛生職業病雜志，1990，8：261 -264.

[2] 周會芹，楊江輝，余琦，等.不同組織固定液對免疫組化結果的影響[J ].診斷病理學雜志， 2009，6(16):478.

[3] 高蓉梅，彭鳳翔，李永春.TO型生物制片透明劑取代二甲苯在病理制片中的應用[J].診斷病理學雜志，2009，12(2):147.

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