GS高清恒染系統(tǒng)在病理常規(guī)染色中的應(yīng)用
GS高清恒染系統(tǒng)在病理常規(guī)染色中的應(yīng)用
孫海濤 趙大勇 孔慶丹
哈爾濱二四二醫(yī)院病理科
摘自:2015年01期《診斷病理學(xué)雜志》
在我國(guó)日常病理技術(shù)工作中,HE染色是每個(gè)病理技術(shù)人員***常用的一項(xiàng)病理基本技術(shù),但在實(shí)際工作中,又很難控制每一張切片染色效果一致性,需要不定期更換試劑,來(lái)保證診斷醫(yī)師的滿意;為了改變這種現(xiàn)狀,使HE染色達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)化,GS高清恒染系統(tǒng)(環(huán)保型)是成功的解決方案。
1. 材料與方法
1.1 材料
隨機(jī)選取哈爾濱二四二醫(yī)院病理科常規(guī)蠟塊。
1.2 試劑
GS高清恒染系統(tǒng)(環(huán)保型)來(lái)自哈爾濱格林標(biāo)本技術(shù)開發(fā)有限公司,系統(tǒng)總共20瓶試劑,包括環(huán)保脫蠟液(無(wú)苯),預(yù)染液,蘇木素(無(wú)汞),分化液,藍(lán)化液(無(wú)氨),伊紅,脫水液,環(huán)保透明液(無(wú)苯)。
1.3 方法
1.3.1 染色
常規(guī)蠟塊連續(xù)切片4微米切片數(shù)張,隨機(jī)分成兩組,一組在GS高清恒染系統(tǒng)(環(huán)保型)中進(jìn)行染色,一組在傳統(tǒng)HE染色系統(tǒng)染色。傳統(tǒng)染色系統(tǒng)按病理技術(shù)操作規(guī)范進(jìn)行操作。
GS-高清恒染系統(tǒng)操作程序
序號(hào) |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
7 |
8 |
9 |
步驟 |
脫蠟液I |
脫蠟液I |
脫蠟液I |
脫蠟液I |
浸水液I |
浸水液I |
浸水液II |
浸水液II |
中性水緩流清洗 |
產(chǎn)品編號(hào) |
GS-H-01 |
GS-H-01 |
GS-H-01 |
GS-H-01 |
GS-H-02 |
GS-H-02 |
GS-H-03 |
GS-H-03 |
|
操作時(shí)間 |
5min |
5min |
5min |
5min |
10s |
10s |
10s |
10s |
1min |
序號(hào) |
10 |
11 |
12 |
13 |
14 |
15 |
16 |
17 |
18 |
步驟 |
蘇木素預(yù)染液 |
蘇木素染色液 |
中性水緩流清洗 |
分化液 |
中性水緩流清洗 |
藍(lán)化液 |
中性水緩流清洗 |
伊紅染色液 |
中性水緩流清洗 |
產(chǎn)品編號(hào) |
GS-H-04 |
GS-H-05 |
|
GS-H-06 |
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GS-H-07 |
|
GS-H-08 |
|
操作時(shí)間 |
20s |
6min |
1min |
2~3s |
1min |
10s |
1min |
1min |
1min |
序號(hào) |
19 |
20 |
21 |
22 |
23 |
24 |
25 |
|
|
步驟 |
脫水 |
脫水 |
脫水 |
脫水II |
脫水III |
透明液 |
透明液 |
封片 |
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產(chǎn)品編號(hào) |
GS-H-09 |
GS-H-09 |
GS-H-09 |
GS-H-10 |
GS-H-11 |
GS-H-12 |
GS-H-12 |
|
|
操作時(shí)間 |
10s |
10s |
10s |
10s |
10s |
30s |
1min |
|
|
1.3.2 評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)
取每組的第1~3000張切片的染色進(jìn)行評(píng)分。將染色后兩組實(shí)驗(yàn)組織切片交由三位醫(yī)師進(jìn)行評(píng)閱。按以下幾個(gè)方面進(jìn)行評(píng)閱:1、切片外觀是否出現(xiàn)乳白色斑片及透明度;2、細(xì)胞核染色強(qiáng)度、染色質(zhì)結(jié)構(gòu)清晰度、背景異染程度;3、細(xì)胞質(zhì)及結(jié)締組織染色強(qiáng)度;4、整體組織染色紅藍(lán)對(duì)比鮮艷程度等四項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行評(píng)分,每項(xiàng)指標(biāo)滿分25分,總計(jì)100分。大于90分為甲級(jí)片。
組別 GS高清恒染系統(tǒng)(環(huán)保型) 傳統(tǒng)染色系統(tǒng)
平均得分 總平均得分 平均得分 總平均分
1 2 3 4 1 2 3 4
1~500 24.9 24.9 24.9 24.9 99.6 24.8 24.6 24.6 24.7 98.7
501~1000 24.7 24.7 24.6 24.5 98.6 24.5 24.2 24.3 24.1 97.1
1001~1200 24.2 24.5 24.3 24.3 97.3 22 .23.5 23.5 22.4 91.4
1201~1500 24.1 24.5 24.2 24.2 97 .22 .23 .23 .22 .90
1501~1800 24.1 24.3 24.2 24.1 96.7 20 .22 .22 .21 .87
1801~2100 24.0 24.3 24.2 24.1 96.6 更換試劑
2101~2500 23.5 24.3 24.1 24.0 95.9
2501~2800 23.0 24.2 24.0 24.1 95.3
2801~3000 23 23 23 22 91
2. 結(jié)果
使用GS高清恒染系統(tǒng)(環(huán)保型)進(jìn)行HE染色,第1張切片至第3000張切片染色較為恒定,切片透明,細(xì)胞核染色強(qiáng)度適宜,染色質(zhì)結(jié)構(gòu)清晰,無(wú)明顯異染現(xiàn)象,細(xì)胞質(zhì)染色鮮艷,整體組織染色紅藍(lán)適度對(duì)比清晰。
3. 討論
在日常工作中,傳統(tǒng)HE染色方式很難保證工作質(zhì)量,切片染到1200之后張出現(xiàn)乳白色斑片、異染共染現(xiàn)象,必須更換試劑,以保證染色質(zhì)量,給日常工作帶來(lái)極大不便。而GS高清恒染系統(tǒng)(環(huán)保型),染色恒定,染色效果好,健康環(huán)保,對(duì)工作人員及環(huán)境沒有污染,特別是預(yù)染液的應(yīng)用提高了蘇木素的使用壽命及染色能力,同時(shí),新型脫水液也具有極強(qiáng)的脫水能力,整個(gè)染色過(guò)程中不需更換,提高了工作效率及穩(wěn)定性,總之,GS高清恒染系統(tǒng)(環(huán)保型),不僅健康環(huán)保,保證了工作質(zhì)量,提高了工作效率,同時(shí)還為病理技術(shù)工作,提供了一套HE染色標(biāo)準(zhǔn)化染色程序,值得我們廣大病理工作者推廣應(yīng)用。
參考文獻(xiàn)
[1] 《實(shí)用現(xiàn)代病理學(xué)技術(shù)》-----董建強(qiáng)、王德田
[2] 《臨床病理操作規(guī)范》———2012人民出版社下載地址: