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GS高清恒染系統(tǒng)在病理常規(guī)染色中的應(yīng)用

GS高清恒染系統(tǒng)在病理常規(guī)染色中的應(yīng)用

孫海濤 趙大勇 孔慶丹

哈爾濱二四二醫(yī)院病理科

摘自:201501期《診斷病理學(xué)雜志》

在我國(guó)日常病理技術(shù)工作中,HE染色是每個(gè)病理技術(shù)人員***常用的一項(xiàng)病理基本技術(shù),但在實(shí)際工作中,又很難控制每一張切片染色效果一致性,需要不定期更換試劑,來(lái)保證診斷醫(yī)師的滿意;為了改變這種現(xiàn)狀,使HE染色達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)化,GS高清恒染系統(tǒng)(環(huán)保型)是成功的解決方案。

1. 材料與方法

 1.1 材料 

隨機(jī)選取哈爾濱二四二醫(yī)院病理科常規(guī)蠟塊。

 1.2 試劑 

GS高清恒染系統(tǒng)(環(huán)保型)來(lái)自哈爾濱格林標(biāo)本技術(shù)開發(fā)有限公司,系統(tǒng)總共20瓶試劑,包括環(huán)保脫蠟液(無(wú)苯),預(yù)染液,蘇木素(無(wú)汞),分化液,藍(lán)化液(無(wú)氨),伊紅,脫水液,環(huán)保透明液(無(wú)苯)。

 1.3 方法

  1.3.1 染色  

常規(guī)蠟塊連續(xù)切片4微米切片數(shù)張,隨機(jī)分成兩組,一組在GS高清恒染系統(tǒng)(環(huán)保型)中進(jìn)行染色,一組在傳統(tǒng)HE染色系統(tǒng)染色。傳統(tǒng)染色系統(tǒng)按病理技術(shù)操作規(guī)范進(jìn)行操作。

GS-高清恒染系統(tǒng)操作程序

序號(hào)

1

2

3

4

5

6

7

8

9

步驟

脫蠟液I

脫蠟液I

脫蠟液I

脫蠟液I

浸水液I

浸水液I

浸水液II

浸水液II

中性水緩流清洗

產(chǎn)品編號(hào)

GS-H-01

GS-H-01

GS-H-01

GS-H-01

GS-H-02

GS-H-02

GS-H-03

GS-H-03

 

操作時(shí)間

5min

5min

5min

5min

10s

10s

10s

10s

1min

 

序號(hào)

10

11

12

13

14

15

16

17

18

步驟

蘇木素預(yù)染液

蘇木素染色液

中性水緩流清洗

分化液

中性水緩流清洗

藍(lán)化液

中性水緩流清洗

伊紅染色液

中性水緩流清洗

產(chǎn)品編號(hào)

GS-H-04

GS-H-05

 

GS-H-06

 

GS-H-07

 

GS-H-08

 

操作時(shí)間

20s

6min

1min

2~3s

1min

10s

1min

1min

1min

 

序號(hào)

19

20

21

22

23

24

25

 

 

步驟

脫水

脫水

脫水

脫水II

脫水III

透明液

透明液

封片

 

產(chǎn)品編號(hào)

GS-H-09

GS-H-09

GS-H-09

GS-H-10

GS-H-11

GS-H-12

GS-H-12

 

 

操作時(shí)間

10s

10s

10s

10s

10s

30s

1min

 

 

 

  1.3.2 評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)  

取每組的第1~3000張切片的染色進(jìn)行評(píng)分。將染色后兩組實(shí)驗(yàn)組織切片交由三位醫(yī)師進(jìn)行評(píng)閱。按以下幾個(gè)方面進(jìn)行評(píng)閱:1、切片外觀是否出現(xiàn)乳白色斑片及透明度;2、細(xì)胞核染色強(qiáng)度、染色質(zhì)結(jié)構(gòu)清晰度、背景異染程度;3、細(xì)胞質(zhì)及結(jié)締組織染色強(qiáng)度;4、整體組織染色紅藍(lán)對(duì)比鮮艷程度等四項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行評(píng)分,每項(xiàng)指標(biāo)滿分25分,總計(jì)100分。大于90分為甲級(jí)片。

 

 

組別         GS高清恒染系統(tǒng)(環(huán)保型)            傳統(tǒng)染色系統(tǒng)

                   平均得分      總平均得分       平均得分         總平均分

              1     2    3     4             1    2     3    4

1~500        24.9  24.9  24.9  24.9  99.6     24.8  24.6  24.6  24.7     98.7

501~1000     24.7  24.7  24.6  24.5  98.6     24.5  24.2  24.3  24.1     97.1

1001~1200    24.2  24.5  24.3  24.3  97.3     22   .23.5  23.5  22.4     91.4

1201~1500    24.1  24.5  24.2  24.2  97      .22   .23   .23   .22      .90

1501~1800    24.1  24.3  24.2  24.1  96.7     20   .22   .22   .21      .87

1801~2100    24.0  24.3  24.2  24.1  96.6         更換試劑

2101~2500    23.5  24.3  24.1  24.0  95.9

2501~2800    23.0  24.2  24.0  24.1  95.3

2801~3000    23    23   23    22   91

 

2. 結(jié)果

使用GS高清恒染系統(tǒng)(環(huán)保型)進(jìn)行HE染色,第1張切片至第3000張切片染色較為恒定,切片透明,細(xì)胞核染色強(qiáng)度適宜,染色質(zhì)結(jié)構(gòu)清晰,無(wú)明顯異染現(xiàn)象,細(xì)胞質(zhì)染色鮮艷,整體組織染色紅藍(lán)適度對(duì)比清晰。

3. 討論

在日常工作中,傳統(tǒng)HE染色方式很難保證工作質(zhì)量,切片染到1200之后張出現(xiàn)乳白色斑片、異染共染現(xiàn)象,必須更換試劑,以保證染色質(zhì)量,給日常工作帶來(lái)極大不便。而GS高清恒染系統(tǒng)(環(huán)保型),染色恒定,染色效果好,健康環(huán)保,對(duì)工作人員及環(huán)境沒有污染,特別是預(yù)染液的應(yīng)用提高了蘇木素的使用壽命及染色能力,同時(shí),新型脫水液也具有極強(qiáng)的脫水能力,整個(gè)染色過(guò)程中不需更換,提高了工作效率及穩(wěn)定性,總之,GS高清恒染系統(tǒng)(環(huán)保型),不僅健康環(huán)保,保證了工作質(zhì)量,提高了工作效率,同時(shí)還為病理技術(shù)工作,提供了一套HE染色標(biāo)準(zhǔn)化染色程序,值得我們廣大病理工作者推廣應(yīng)用。

 

 

參考文獻(xiàn)

[1] 《實(shí)用現(xiàn)代病理學(xué)技術(shù)》-----董建強(qiáng)、王德田

[2] 《臨床病理操作規(guī)范》———2012人民出版社
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