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病理論壇在線咨詢無醛、無苯、無汞—GS環保型病理制片套液的應用體會
無醛、無苯、無汞—GS環保型病理制片套液的應用體會
吳克非
哈爾濱醫科大學附屬第二醫院病理科
目前，國內外一直普遍應用的甲醛固定、梯度乙醇脫水、二甲苯透明和脫蠟的傳統病理制片技術已誕生的150多年，雖能達到臨床診斷目的，但這種方法在制片過程中大量使用甲醛、二甲苯、氧化汞等有毒有害化學試劑。而甲醛、二甲苯對人體造血系統、神經系統等有較強的損害作用，有致癌性，是引發病理專業人員職業性苯中毒的主要試劑。使用后廢棄的試劑，又對環境造成嚴重危害，替代甲醛、二甲苯試劑是病理操作人員多年以來的夢想。
針對上述情況，哈爾濱格林標本技術開發有限公司的多位病理專家經過多年的研究探索，終于開發出了******首創的全新病理技術平臺—GS無醛、無苯、無汞環保型組織標本制備及切片染色技術。我院自2010年初使用至今，已應用10000余例人體組織樣本制片，現將使用體會總結如下：
1. 材料和方法
1.1 材料
手術室送檢的脂肪、淋巴結、乳腺、皮膚、肝臟等人體組織。
1.2 方法
組織樣本取材體積在1.5×1.5×0.3cm3范圍內，肌肉組織面積適中、厚薄均勻；淋巴組織剖開后再固定；骨組織須先固定再脫鈣。而后采用GS 無醛、無苯標本制備套液在全自動全封閉脫水機進行組織處理，同時利用GS無苯工作槽清洗液對脫水機工作槽進行清洗；再經過GS無苯、無汞切片染色套液進行切片染色，***后采用GS無苯封片膠進行封片。
1、無醛組織固定液
2、組織脫水液Ⅰ
3、組織脫水液Ⅱ
4、無苯組織透明液
5、組織浸蠟液Ⅰ
6、組織浸蠟液Ⅱ
全自動全封閉組織脫水機操作程序
|
工作缸 |
試劑名稱 |
工作時間 |
合計時間 |
|
1號 |
無醛組織固定液 |
1小時 |
4小時 |
|
2號 |
無醛組織固定液 |
3小時 |
|
|
3號 |
75%乙醇 |
5分鐘 |
10分鐘 |
|
4號 |
75%乙醇 |
5分鐘 |
|
|
5號 |
組織脫水液I |
30分鐘 |
1.5小時 |
|
6號 |
組織脫水液I |
1小時 |
|
|
7號 |
組織脫水液II |
30分鐘 |
1.5小時 |
|
8號 |
組織脫水液II |
1小時 |
|
|
9號 |
無苯組織透明液 |
1小時 |
3小時 |
|
10號 |
無苯組織透明液 |
2小時 |
|
|
蠟缸1號 |
組織浸蠟液I |
3小時 |
3小時 |
|
蠟缸2號 |
組織浸蠟液II |
2小時 |
3小時 |
|
蠟缸3號 |
組織浸蠟液II |
1小時 |
|
|
11號 |
無苯工作槽清洗液I |
自動標準清洗程序 |
|
|
12號 |
無苯工作槽清洗液II |
自動標準清洗程序 |
|
|
13號 |
無水乙醇或純凈水 |
自動標準清洗程序 |
|
|
14號 |
廢液收集 |
|
|
1、無苯切片脫蠟液I 
2、無苯切片脫蠟液Ⅱ
3、無汞蘇木素染色液
4、伊紅染色液
5、除浮染液
6、除水透明液
7、切片透明液
常規石蠟組織切片HE染色程序
-
|
序號 |
1 |
→ |
2 |
→ |
→ |
3 |
→ |
|
步驟 |
脫蠟液Ⅰ |
脫蠟液Ⅰ |
脫蠟液Ⅱ |
95%乙醇 |
自來水 緩流清洗 |
蘇木素 染色液 |
自來水 緩流清洗 |
|
用時 |
5～10min |
5～10min |
2～3min |
10～20s |
2min |
3～5min |
10s |
|
序號 |
|
→ |
|
→ |
4 |
→ |
|
步驟 |
分化液 |
自來水 緩流清洗 |
藍花液 |
自來水 緩流清洗 |
伊紅 染色液 |
自來水 緩流清洗 |
|
用時 |
2～3min |
1～2s |
5～10s |
1～2min |
30～60s |
1～2s |
|
序號 |
5 |
→ |
→ |
6 |
→ |
7 |
→ |
|
步驟 |
除浮 染液 |
無水乙醇 |
瀝干 |
除水 透明液 |
瀝干 |
透明液 |
潮干 封片 |
|
用時 |
3s |
1min |
|
1min |
|
2min |
|
2. 結果
使用GS環保型病理制片套液，結果符合臨床病理診斷要求。制片步驟由傳統的三十幾個步驟縮短至十三個步驟，并且效果穩定。處理后的組織固定好、脫水徹底、蠟塊軟硬適中；組織切片核漿對比清晰；同時對于硬組織（如子宮組織、皮膚組織等）能夠大幅度節約切片機刀片。
GS環保型病理制片套液適用于常規組織樣本制備及切片染色、術中冷凍切片染色、脫落細胞染色、免疫組織化學染色以及分子生物學（圖1，2，3，4）。
HE×10 HE×4
3. 討論
隨著國家對節能減排的要求越來越高，甲醛、二甲苯等有毒害產品被強制性回收，ＧＳ無醛、無苯、無汞――環保型病理試劑每年可減少近千萬噸的甲醛、二甲苯等有毒害氣體排放，所產生間接的經濟效益和社會效益無法估量。
哈爾濱格林標本技術開發有限公司自主研發的ＧＳ環保型病理制片套液效果符合制片要求，不影響病理診斷，完全可以替代百年來使用的傳統甲醛、二甲苯制片方法。在保證制片質量的同時，確保了病理工作者的健康，有利于環境保護。希望格林公司能繼續研發出病理相關的其他環保產品，也希望廣大同行能共同參與到此項利國利民利已的工作當中。
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