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病理論壇在線咨詢GS環保試劑套液在骨髓穿刺石蠟切片中的應用
繆勇建 王華
廣西醫科大學******附院病理科
摘自：2011年第05期《診斷病理學雜志》
我科過去做骨髓穿刺石蠟切片都應用常規的甲醛固定及酒精脫水二甲苯透明，為了讓骨髓穿刺組織更易于切片、常規染色和特染更鮮艷、免疫組化陽性更好，筆者不斷改進脫水程序，但骨組織還是太硬，造血細胞收縮較明顯，不能切出完美的薄切片（1～1.5μm），無法看清胞漿胞核內顆粒，因為骨髓組織經脫鈣后再入常規脫水劑中會嚴重收縮，原長度為1cm的骨穿組織會變成只有0.8cm；從2009年10月開始用GS 環保試劑至今，不但骨髓穿刺組織好切片，大塊脫鈣骨組織也很好切，且細胞無明顯收縮，染色正常。
1. 材料與方法
1.1材料
我院一年來所有的骨髓穿刺標本約400例，GS環保試劑套液(由哈爾濱格林標本技術開發有限公司研制并生產)，脫水機為Shandon Pathcentre全封閉全自動脫水機，Shandon Finesse旋轉石蠟切片機，櫻花全自動染色機，自配HE染色液，櫻花自動封片機、中性樹膠等。
1.2方法
骨髓穿刺標本經脫鈣后入下列程序處理（大小不同的標本均放在一起）：
|
試劑溶液 |
時間設定 |
溫度 （℃）設定 |
P/V循環（壓力和真空交替） |
混合循環 |
|
1、GSA01（Ⅰ） |
2.00h |
40 |
＋ |
＋ |
|
2、GSA01（Ⅱ） |
1.00h |
40 |
＋ |
＋ |
|
3、70％乙醇 |
40min |
40 |
＋ |
＋ |
|
4、80％乙醇 |
40min |
40 |
＋ |
＋ |
|
5、GSA02（Ⅰ） |
1.00h |
40 |
＋ |
＋ |
|
6、GSA02（Ⅱ） |
40min |
40 |
＋ |
＋ |
|
7、GSA03（Ⅰ） |
1.00h |
40 |
＋ |
＋ |
|
8、GSA03（Ⅱ） |
40min |
40 |
＋ |
＋ |
|
9、GSA04（Ⅰ） |
1.00h |
40 |
＋ |
＋ |
|
10、GSA04（Ⅱ） |
40min |
40 |
＋ |
＋ |
|
11、GSA05（Ⅰ） |
40min |
65 |
＋ |
＋ |
|
12、GSA05（Ⅱ） |
50min |
65 |
＋ |
＋ |
|
13、GSA06（Ⅰ） |
1.00h |
65 |
＋ |
＋ |
|
14、GSA06（Ⅱ） |
1.00h |
65 |
＋ |
＋ |
從脫水機取出，石蠟包埋，切片厚度1～1.5μm ，在自動染色機中用環保脫蠟至水洗，常規HE染色（蘇木精染液不含汞），脫水、透明、中性樹膠封片。
2. 結果
細胞紅藍鮮艷，對比正常，胞體豐滿，組織結構清晰圖（1，2，3）。
3. 討論
由于組織細胞常規染色形態正常，色彩也鮮艷，做特染、免疫組織化學和ISH都有“出色表現”，己經被我科所有診斷醫師認可；由于脫水機使用了GS環保試劑，我們在更換試劑或舊石蠟時再也沒有二甲苯那令人窒息的臭味，也沒有甲醛的刺眼，維護機器時從容不迫了，環境大大改善。筆者認為GS環保試劑可以信賴，關鍵在于如何根據自己的使用環境和設備狀態，巧妙設計程序。根據每一缸的新舊情況變化，適時調整和及時更換也至關重要。每套程序都是有“個性”的，不能完全照搬！程序看似簡單，但只有深刻理解了才會設計出高水平的程序。
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