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病理論壇在線咨詢GS－新型環(huán)保病理組織標(biāo)本處理試劑應(yīng)用報(bào)告
GS－新型環(huán)保病理組織標(biāo)本處理試劑應(yīng)用報(bào)告
連國(guó)亮 石鳳茹 肖磊
首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京安貞醫(yī)院病理科
常規(guī)石蠟包埋切片，蘇木素－伊紅染色(HE)是當(dāng)前醫(yī)院病理科進(jìn)行病理診斷的常規(guī)方法，是保證病理診斷準(zhǔn)確***重要的環(huán)節(jié)。只有做出優(yōu)質(zhì)石蠟切片，才能準(zhǔn)確做出組織化學(xué)、免疫組織化學(xué)染色，有助于提高病理診斷和鑒別診斷的準(zhǔn)確率。但傳統(tǒng)石蠟切片制作過(guò)程中大量使用甲醛、二甲苯等有毒有害試劑，對(duì)操作人員產(chǎn)生巨大傷害，成為了病理工作中無(wú)形的殺手，同時(shí)產(chǎn)生的廢棄物，又會(huì)對(duì)環(huán)境造成更嚴(yán)重的二次污染，甲醛、二甲苯更成為了人們對(duì)病理科望而卻步的魔鬼。并且傳統(tǒng)組織處理過(guò)程紛繁復(fù)雜，尤其二甲苯對(duì)組織處理時(shí)間準(zhǔn)確度要求較高，試劑量消耗較大，耗費(fèi)了更多的人力、物力和財(cái)力。而新型格林組織固定脫水系列套裝試劑和HE染色系列套裝試劑為無(wú)苯無(wú)害試劑，2009年8月始我們對(duì)格林公司的上述試劑進(jìn)行了試用，現(xiàn)將試用結(jié)果介紹如下。
一、試用計(jì)劃
1．材料
選取我院病理科09年8月至11月各種病理組織標(biāo)本200例，包括脂肪，子宮，胎盤，皮膚，小腸等組織。
2．儀器設(shè)備
選用櫻花全自動(dòng)密閉脫水機(jī)，櫻花組織自動(dòng)包埋機(jī)，徠卡封片機(jī)。
3．操作方法
使用格林公司無(wú)苯試劑，按照其推薦的方法進(jìn)行組織處理（包括固定、脫水、透明、浸蠟、包埋，HE染色以及樹膠封固全套試劑）
二、結(jié)果對(duì)比
（一）組織處理程序?qū)Ρ?/b>
|
序號(hào) |
傳統(tǒng)組織處理程序 |
格林系列套裝試劑處理程序 |
備注 |
||
|
溶液種類 |
時(shí)間 |
溶液種類 |
時(shí)間 |
||
|
1 |
10%中性甲醛液 |
60分鐘 |
固定液 |
210分鐘 |
|
|
2 |
80%酒精溶液脫水 |
60分鐘 |
脫水液 |
90分鐘 |
|
|
3 |
95%酒精溶液I脫水 |
60分鐘 |
脫水液 |
90分鐘 |
|
|
4 |
95%酒精溶液I脫水 |
60分鐘 |
透明液 |
90分鐘 |
|
|
5 |
95%酒精溶液II脫水 |
60分鐘 |
|
0分鐘 |
|
|
6 |
純酒精溶液I脫水 |
60分鐘 |
|
0分鐘 |
|
|
7 |
純酒精溶液II脫水 |
60分鐘 |
|
0分鐘 |
|
|
8 |
純酒精溶液III脫水 |
60分鐘 |
|
0分鐘 |
|
|
9 |
二甲苯溶液I透明 |
60分鐘 |
|
0分鐘 |
|
|
10 |
二甲苯溶液II透明 |
30分鐘 |
|
0分鐘 |
|
|
I |
48~50℃石蠟浸蠟 |
60分鐘 |
浸蠟液 |
150分鐘 |
|
|
II |
50~56℃石蠟浸蠟 |
60分鐘 |
浸蠟液 |
150分鐘 |
|
|
III |
58~60℃石蠟浸蠟 |
60分鐘 |
|
0分鐘 |
|
|
IV |
58~60℃石蠟浸蠟 |
60分鐘 |
|
0分鐘 |
|
|
|
|
810分鐘 |
|
780分鐘 |
|
（二）染色程序?qū)Ρ?/b>
|
序號(hào) |
傳統(tǒng)染色程序 |
格林系列套裝試劑組織染色程序 |
備注 |
||
|
|
程序 |
時(shí)間 |
程序 |
時(shí)間 |
|
|
1 |
脫蠟:1-4缸 |
10*4分鐘 |
1．脫蠟 |
15分鐘 |
|
|
2 |
無(wú)水酒精 |
3分鐘 |
2．脫蠟 |
5分鐘 |
|
|
3 |
95%酒精 |
3分鐘 |
3．水洗 |
|
|
|
4 |
80%酒精 |
3分鐘 |
4．蘇木素 |
1-3分鐘 |
|
|
5 |
蘇木素 |
5-10分鐘 |
5．水洗 |
數(shù)秒 |
|
|
6 |
自來(lái)水水洗 |
1分鐘 |
6．分化液 |
3秒 |
|
|
7 |
自來(lái)水返藍(lán) |
5分鐘 |
7．水洗反藍(lán) |
|
|
|
8 |
伊紅 |
1分鐘 |
8．伊紅 |
1分鐘 |
|
|
9 |
80%酒精脫水 |
2分鐘 |
9．水洗 |
數(shù)秒 |
|
|
10 |
95%酒精 |
5分鐘 |
10．除浮液 |
3秒 |
|
|
11 |
無(wú)水酒精 |
5分鐘 |
11．瀝干 |
|
|
|
12 |
無(wú)水酒精 |
5分鐘 |
12．脫水透明液 |
2分鐘 |
|
|
13 |
丙酮 |
5分鐘 |
13．瀝干 |
|
|
|
14 |
丙酮 |
5分鐘 |
14．透明液 |
1分鐘 |
|
|
15 |
二甲苯 |
10分鐘 |
15．潮干 |
|
|
|
16 |
二甲苯 |
10分鐘 |
16．無(wú)苯膠水封片 |
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|
17 |
二甲苯 |
10分鐘 |
|
|
|
1）HE染色系列套裝試劑化學(xué)成分與組織脫水套裝試劑基本相同。
2）蘇木素，伊紅，染色所用時(shí)間短，著色能力強(qiáng)，核質(zhì)清晰。
3）脫蠟劑在室溫下2×5分鐘對(duì)組織脫蠟，******缸脫蠟，第二缸脫蠟基本無(wú)味。
4）蘇木素常規(guī)染色大于1分鐘，對(duì)低濃度分化液非常敏感，分化時(shí)間嚴(yán)格制。
5）水洗返藍(lán)1鐘即可，同時(shí)反復(fù)擺動(dòng)，提倡節(jié)約水資源。
6）伊紅常規(guī)染色大于1分鐘，但數(shù)秒也可著色。